LP-UV－NIR260紫外可見近紅外分光光度計(jì)
1,、基本工作原理
1）吸收的本質(zhì)：分光光度法是利用物質(zhì)對不同波長光的選擇吸收特性而建立起 來的分析方法。通常利用棱鏡或光柵分光來取得單色光,，使單色光連續(xù)地依次通 過溶液,，并測得該溶液對每一波長的吸收，得到吸收光譜曲線,。
吸收光譜來源于物質(zhì)對光的選擇吸收,，這是物質(zhì)的宏觀現(xiàn)象，而吸收的本質(zhì) 是分子內(nèi)部運(yùn)動和光相互作用的結(jié)果,。當(dāng)物質(zhì)的分子吸收一定能量或波長的光譜 后,，透過的光譜中有些波長被吸收就形成了吸收光譜。吸收的能量愈小,，則相應(yīng)
的光的波長,，吸收峰出現(xiàn)在較長波段。當(dāng)吸收在紅外區(qū)時(shí)形成紅外吸收光譜,，如 果吸收能量愈大,，則相應(yīng)的波長愈短，吸收峰出現(xiàn)在較短波段,，當(dāng)吸收在紫外區(qū) 產(chǎn)生紫外吸收光譜,。
2）吸收定律—朗伯比耳定律：當(dāng)一束平行單色光通過均勻的溶液時(shí)，其吸光度
與溶液的濃度和厚度的乘積成正比,。
其數(shù)字表達(dá)式：A=KCL=LogI0/I=-LogT
吸收定律數(shù)字表達(dá)式成立的前提：①,，入射光為單色光，②,，吸收過程中各
物質(zhì)無相互作用,，各物質(zhì)吸光度具有加和性，③,，光與物質(zhì)的作用*于吸收過
程,，沒有熒光散射和光化學(xué)現(xiàn)象，④，吸收物是一種均勻分布的連續(xù)體系,，
3）影響分光光度法的原因：
a,，輻射與物質(zhì)的非吸收作用引起的誤差，
b,，熒光與光化學(xué)反應(yīng)的影響,，一般說來，熒光對分光光度測量產(chǎn)生的誤差
可以忽略,，多數(shù)情況下顯色體系的熒光效率很小,，而且熒光發(fā)射是各向同性，只
有一小部分沿著透射光方向進(jìn)入檢測器,，使測量吸光度偏低,，產(chǎn)生負(fù)偏離。熒光
對吸收測量的影響*程度上決定于儀器的吸收池和檢測器光學(xué)設(shè)計(jì),， c,，反射和散射，吸收定律只適用于均勻介質(zhì)的吸收體系,，渾濁溶液因散射 使實(shí)測吸光度增加,，導(dǎo)致偏離比耳定律，
d,，儀器的非理想性引起的誤差,，
e，復(fù)色光對比耳定律的偏離,，大多數(shù)光度計(jì)只能獲得接近于單色光的狹窄 的光通帶,，實(shí)際上仍是有復(fù)色光性質(zhì)，可導(dǎo)致偏離比耳定律,。偏離的大小取決于 二單色光的摩爾吸光系數(shù)差△ε，|△ε|很小時(shí),，可近似認(rèn)為是單色光,，在低濃
度時(shí)，工作曲線仍為直線,，但濃度較大時(shí),，隨濃度增大，A-C曲線彎曲愈嚴(yán)重,，
故比耳定律只適用于稀溶液,，
f 雜散光，雜散光是指進(jìn)入檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的不需要
的其它波長組分,。其主要來源于分光光度計(jì)色散元件棱鏡或光柵,、反射鏡、透鏡
表面的散射，單色器內(nèi)壁灰塵及其它元件傷痕的反射和漫射等,，雜散光可引起嚴(yán)
重的測量誤差,。在儀器能量處于小的波長處，雜散光通常處于大值（如氘燈 220nm,鎢燈 340nm）,，
g,，狹縫寬度，狹縫寬度不僅影響光譜的純度,，也影響吸光度值,。在定量分
析時(shí)，為了得到足夠的測量信號,，應(yīng)采用較大的狹縫,，在定性分析時(shí)則采用較小 的狹縫，當(dāng)出射狹縫和入射狹縫的寬度相等時(shí),，狹縫寬度引起的誤差小

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