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產(chǎn)品名稱：磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）測試盒價格

規(guī)格 : 50管/48樣,、100管/96樣

測試方法:微量法,、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6464

測定意義

PEPC（EC 4.1.1.31）廣泛存在于動物,、植物、微生物和細胞中,，是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應(yīng)生成草酰乙酸呈不可逆反應(yīng)的酶,，對三羧酸循環(huán)的運轉(zhuǎn)起重要調(diào)節(jié)作用。

測定原理：

PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,，蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,，在340nm測定NADH減少速率，計算PEPC活性,。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀,、臺式離心機、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,，體積可達2.000ml,。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 ,。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0,。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘,。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）,。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎,、攪勻固體或半固體樣品,，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白,。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取,。

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法,。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的,。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾,、鎳,、銅、銀,、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了,。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后),。

(6)分析成本低,、操作簡便、快速

Anti-Paxillin/FITC 熒光素標記樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-human IgG/FITC 熒光素標記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

細胞外基質(zhì)蛋白1抗體 Anti-ECM1 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml

FGFBP1 英文名稱： 纖維細胞生長因子結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-TERT(Ser1125) 磷酸化端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/FITC 熒光素標記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

NADPH peptide 還原型Ⅱ抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATG4D(Ser341) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體 規(guī)格 0.1ml

山羊抗大鼠 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美國公司分裝

VGLL3 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3抗體 0.2ml

DIRAS1 英文名稱： RAS相關(guān)抑細胞生長蛋白1抗體 0.2ml

Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

STK40 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶40抗體 0.2ml

ETV2 英文名稱： ETS相關(guān)蛋白71抗體 0.2ml

XIAP相關(guān)因子1抗體 anti-XAF1 0.2ml

Anti-TSLP/FITC 熒光素標記細胞生成素-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(S474) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 規(guī)格 0.1ml

active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）測試盒價格十二烯基丁二酸酐(>98%,，BR)白當歸腦BCL2（抗人,；抗兔；抗小鼠,；抗大鼠）

癸二酸(>96%,，BR)新橙皮苷二氫查爾酮 Caspase 1 （抗人；抗兔；抗小鼠,；抗大鼠）

脫氫乙酸(>98%,，BR)馬錢苷酸 Caspase-2-G（抗人；抗兔,；抗小鼠,；抗大鼠）

脫羰秋水仙堿仙鶴草酚BCaspase-3（抗人；抗兔,；抗小鼠,；抗大鼠）

DON素，嘔吐素,；脫氧雪腐鐮刀菌烯(>98%(HPLC),BR)升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷 Caspase-4 p20（抗人；抗兔,；抗小鼠,；抗大鼠）

第威德合金牡荊素鼠李糖苷 Caspase 6（抗人；抗兔,；抗小鼠,；抗大鼠）

二乙酰一肟(>98%，BR)牡荊素 Caspase-7（抗人,；抗兔,；抗小鼠；抗大鼠）

二丁基二月桂酸錫(>95%,BR)20(R)人參g3 Caspase-8（抗人,；抗兔,；抗小鼠；抗大鼠）
操作步驟:

實驗開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應(yīng)預測樣品含量，如樣品濃度過高時,，應(yīng)對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔,、標準孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準確性,，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。