產(chǎn)品名稱：順烏頭酸酶（ACO）活性檢測試劑盒品牌

規(guī)格 : 50管/48樣,、100管/96樣

測試方法:微量法,、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6457

測定意義

順烏頭酸酶（aconitase），三羧酸循環(huán)中的酶,，催化檸檬酸轉變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化,，在順烏頭酸酶作用下，通過脫水與加水反應,，使羥基由β碳原子轉移到α碳原子上,，生成易于脫氫氧化的異檸檬酸，為進一步的氧化脫羧反應作準備,。

測定原理

ACO催化檸檬酸轉化成異檸檬酸,，異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH,，導致340nm處光吸收上升。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計,、水浴鍋、臺式離心機,、可調式移液器,、1mL石英比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細閱讀購買說明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,，體積可達2.000ml,。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 ,。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0,。

5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘,。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）,。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎,、攪勻固體或半固體樣品,，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白,。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取,。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液100μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體,，甩干，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制）,，酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應,，此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液,。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法,。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的,。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷,、鈾,、鎳、銅,、銀,、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾,。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后),。

(6)分析成本低、操作簡便,、快速

Anti-HSP-70/HRP 辣根過氧化物酶標記熱休克蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

human IgM (親和純化)人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg

抗組蛋白抗體 Anti-Histone H3 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG 兔抗馬IgG 1mg

FAM78B 英文名稱： FAM78B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

human IgM (親和純化)人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg

TP53(tumor protein p53; Li-Fraumeni syndrome) 抗P53抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

Anti-Caldesmon 鈣介質素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDHB 丙酮酸脫氫酶E1β亞單位抗體 規(guī)格 0.2ml

Bcl-2 濃縮液 0.1ml 進口分裝

TrkA 英文名稱： 酪酸激酶A抗體 0.1ml

Phospho-CEBP alpha (Thr222 + Thr226) 英文名稱： 磷酸化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體 0.1ml

Anti-Caldesmon 鈣介質素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SOCS1 英文名稱： 細胞因子信號傳導抑制蛋白1抗體 0.1ml

Epac1 英文名稱： 環(huán)磷酸腺苷調節(jié)鳥嘌呤核苷酸交換因子1抗體 0.2ml

孤菲肽/痛敏肽抗體 Anti-Nociceptin 0.1ml

Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 熒光素標記磷酸化受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53結合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

ABCG1 peptide 三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
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