實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一,、洋蔥伯克氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無(wú)到有,，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì),。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min,。
3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：洋蔥伯克氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱：Burkholderia cepacia
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,，-20℃保存,，保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定,，具體見(jiàn)使用方法）,。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷,。

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產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用,，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛勘Ｊ匦蛄性O(shè)計(jì)的專一性引物,，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng),。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),，避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Lactobacillus salivarius唾液乳酸桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，菌體多形態(tài),，厭氧生長(zhǎng)，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)乳酸,。乳制品

Lactococcus lactis 乳酸乳球菌PCR試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌,，菌體桿狀，好氧生長(zhǎng),。模式菌株

Lactococcus lactis 乳酸乳球菌染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株分析檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，形成芽孢，厭氧生長(zhǎng),。Sterility test

Lactococcus lactis 乳酸乳球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒模式菌株分類革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，好氧，呼吸代謝,，菌體形狀發(fā)生桿-球循環(huán)變化,。模式菌株；Produces uricase (U.S. Pat. 3,767,533).

Lactococcus spp. 乳酸桿菌屬通用PCR試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌,，菌體桿狀周生鞭毛運(yùn)動(dòng),；兼性厭氧，發(fā)酵代謝,。模式菌株

Lactococcus spp. 乳酸桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒模式菌株分類革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，菌體桿狀，發(fā)酵代謝葡萄糖主要產(chǎn)生乳酸,。模式菌株

Lactococcus spp. 乳酸桿菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，形成芽孢。

Langat病毒RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，菌體桿狀,，發(fā)酵代謝葡萄糖主要產(chǎn)生乳酸,。乳制品

Langat病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，菌體球狀,，發(fā)酵代謝葡萄糖主要產(chǎn)生乳酸。Produces nisin

Langat病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,，化能異養(yǎng),，產(chǎn)乙酸（醋酸）。

Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，菌體桿狀,，發(fā)酵代謝葡萄糖主要產(chǎn)生乳酸。乳制品

Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,，細(xì)胞桿菌,。臨床常見(jiàn)細(xì)菌。

Lassa Fever Virus(LASV)拉沙熱病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒模式菌株分類革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,，菌體桿狀,，發(fā)酵代謝葡萄糖主要產(chǎn)生乳酸。模式菌株

Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,，細(xì)胞桿狀,；好氧，呼吸代謝,。

Latino virus(LATV)拉蒂諾病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,，細(xì)胞桿狀；好氧,，呼吸代謝,。
洋蔥伯克氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒山羊抗人H因子抗體-親和純化　Goat anti-Factor H - Affinity Pure

山羊抗人HCG抗體-親和純化　Goat anti-HCG （intact） - Affinity Pure

山羊抗人CKMM抗體-親和純化　Goat anti-CKMM - Affinity Pure

山羊抗人B因子抗體-親和純化　Goat anti-Factor B - Affinity Pure

山羊抗人alpha-1-凝乳蛋白酶抗體-親和純化　Goat anti-alpha-1-Antichymotrypsin - Affinity Pure

山羊抗甲胎蛋白抗體，Ig形式　Goat anti-Alpha Fetoprotein,， Ig Fraction

山羊抗甲胎蛋白抗體,，Ig-F（ab）’2片段化形式　Goat anti-Alpha Fetoprotein， Ig Fraction- F（ab）’2 Fragment

山羊抗CKMM抗體,，Ig形式　Goat anti-CKMM,， Ig Fraction

殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體2DS5　KI2S5 Polyclonal Antibody
使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7,，6,，5，4,，3,，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）,。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,，必須設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,，一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）,。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。