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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>定量PCR試劑盒>>探針法熒光定量PCR試劑盒>> 50T卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2020-09-29 10:31:31瀏覽次數(shù):355次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP6934 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Moraxella catarrhalis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運輸及保存
低溫運輸,,-20℃保存,,保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,,具體見使用方法),。
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng),。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR,。
本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷。?
實驗過程:
一,、卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,,5,,4,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取,,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照),??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Podophyllotoxin腫瘤關(guān)聯(lián)鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子2檢測試劑盒20mg
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribosomal Protein L23A (RPL23A)
GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 IL17 / IL17A 蛋白*250(g)
人細胞間粘附分子3(ICAM3)UBE2O/E2 230K 泛素結(jié)合酶E2O抗體規(guī)格:96T/48TAcyclovir規(guī)格:150mgAP2A2檢測試盒2mg人鼻咽癌細胞,,CNE1細胞1x10^6cells
Fangchinoline腫瘤壞死因子α檢測試劑盒20mg
馬兜鈴A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Aristolochic acid A
免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 NTF3 / Neurotrophin 3 蛋白*250(g)
人纖溶酶原激活抑制子1(PAI1) ELISA試盒PTK9/TWF1 蛋白酪氨激酶9抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:200mg脂肪炎癥子檢測試盒20mg人鼻咽癌細胞,,CNE2細胞1x10^6cells
98%100g25ml總膽固醇(TC)檢測試劑盒(單試劑CODPAP比色法)Vitamin K
再生蛋白1(NEO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neogenin 1 (NEO1)
AC Broth250流行性腮腺炎病IgG抗體檢測試盒5mgγ干擾素檢測試盒Interleukin2
98%25ml100ml總膽固醇(TC)檢測試劑盒(單試劑CODPAP微板法)crystallinαB
無水鈉(農(nóng)殘級) 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級 Sodium sulfate anhydrous
Martin Broth ,Modified250神經(jīng)絲中鏈蛋白M檢測試盒5mg白細胞介素2檢測試盒PICP
98%100ml250mg尿(UA)檢測試劑盒(尿酶過化物酶比色法)Collagen triple helix repeatcontaining protein 1
N-基-1-(2-乙基)-4- 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg/支 2號染色體開放閱讀框69抗體 1,25 DHVD3 ELISA Kit 1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)ELISA試劑盒
Martin Agar Medium ,Modified250凝血子Ⅷ相關(guān)抗原檢測試盒5mgI型前膠原羧基端肽檢測試盒Boneglaprotein;Osteocalcin
卡他莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒馬錢苷;Loganin CAS號: 1852942 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蒙花苷;Linarin CAS號: 480364 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
馬錢苷;Loganic acid CAS號: 22255409 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
木犀草素;Luteolin CAS號: 491703 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
麥冬皂苷D;Ophiopogonin D CAS號: 945619749 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
2”O沒食子酰金絲桃苷;2”O CAS號: 53209271 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
木糖;Xylitol CAS號: 87990 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
莽草;Shikimic acid CAS號: 138590 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
木蝴蝶苷B;Oroxin B CAS號: 114482869 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
木蝴蝶苷A;Oroxin A CAS號: 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
漏蘆甾;Rhapontisterone CAS號: 137476712 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
羅漢果甜IV;Mogroside IV CAS號: 88915644 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
羅漢果苷III;Mogroside II CAS號: 130567838 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
律草;Humulone CAS號: 26472413 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
龍膽;2,5Dihydroxyben CAS號: 490799 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
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