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上海研生實業(yè)有限公司
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肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2020-09-28 11:32:41瀏覽次數(shù):303次

聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 YSP6869 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應,。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應,。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR,。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Klebsiella pnenmoniae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,,保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,,具體見使用方法),。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),,一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三,、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復,,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實驗過程:
一,、肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
非模式菌株研究子囊菌類酵母菌,。

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非模式菌株研究子囊菌類酵母菌。葡萄酒酵母

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肺炎克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒MTA1抗體 MTA1 Antibody,,MTA1,,MTA-1,Metastasis Associated Protein 1

mStrawberry單克隆抗體(4C9),HRP偶聯(lián) Anti-mStrawberry Monoclonal Antibody (4C9), HRP Conjugated

mStrawberry mStrawberry Polyclonal Antibody

mStrawberry mStrawberry Polyclonal Antibody

MST-2/Krs-1抗體 MST-2/Krs-1 Antibody,,MST-2,,MST2,STK3,,F(xiàn)LJ90748,KRS1

MST-1/Krs-2抗體 MST-1/Krs-2 Antibody,,MST1,,MST-1,KRS2,,STK4,,DKFZp686A2068 ,YSK3

MSH6抗體 MSH6 Antibody,,MSH-6,,MSH 6,DNA mismatch repair protein Msh6,,G/T mismatch-binding protein,,GTMBP,GTBP,,mutS (E. coli) homolog 6,,HNPCC 5,HNPCC5,,MSH 6,,MSH6

MSH2抗體 MSH2 Antibody,,HNPCC,COCA1,,F(xiàn)low cytometryC1,,HNPCC1,BAT-26,,F(xiàn)amilial Nonpolyposis Colon Cancer Type 1,,Colorectal Cancer Type 1

MRS2MagnesiumTransporter抗體(50ul) Anti-MRS2 Magnesium Transporter

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