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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP6917 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 公司產品僅用于科研 |
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:悉尼馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Marteilia sydneyi
產品規(guī)格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品,。
運輸及保存
低溫運輸,,-20℃保存,保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板,、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法),。
產品及特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,,與相關病毒無交叉反應,。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,,避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研,,不能用于臨床診斷,。?
實驗過程:
一、悉尼馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,后在72℃ 保溫7min,。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
2. 標記6個離心管,,分別為7,6,,5,,4,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),,一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三,、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍,。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好,。
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非模式菌株研究子囊菌類酵C9H13NO性狀:Liquid純度:%
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Theophylline特異性: 人、大鼠,、小鼠Caspase-2 mRNA原位雜交試劑盒
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Preskimmianine特異性: 人,、大鼠,、小鼠Caspase-5 mRNA原位雜交試劑盒
10-Hydroxycamptothecin特異性: 人、大鼠,、小鼠Caspase-6 mRNA原位雜交試劑盒
Zanthobungeanine特異性: 人,、大鼠、小鼠,、豬、兔,、狗Caspase-3 mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ALYREF Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-SATB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C11H12N2O2性狀:Powder純度:99.0%
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Anti-AMACR/P504S Monoclonal Antibody英文名稱: Anti-MCM10 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H24N2O2性狀:Powder純度:96.5%
Anti-AMBP Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-RGS14 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H20NO4性狀:Yellow powder純度:99.0%
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Anti-AMBRA1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ANG Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H14NO4性狀:Orange needles純度:98.5%
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Anti-AMDHD2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ASPSCR1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H30N2O5性狀:Powder純度:97.5%
Anti-AMHR2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ADAMTS7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H37NO6性狀:Powder純度:95.0%
?究子囊菌類酵母菌,。產乙酸乙酯,生香酵母,。
悉尼馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Kir4.1抗體(50ul) Anti-Kir4.1
Kir4.1抗體(25ul) Anti-Kir4.1
Kir4.1抗體(0.2ml) Anti-Kir4.1
Kir4.1抗體(0.2ml) Anti-Kir4.1
Kir4.1-ATTO-488抗體(50ul) Anti-Kir4.1-ATTO-488
Kir4.1(胞外)抗體(50ul) Anti-Kir4.1 (extracellular)
Kir4.1(胞外)抗體(25ul) Anti-Kir4.1 (extracellular)
Kir4.1(胞外)抗體(0.2ml) Anti-Kir4.1 (extracellular)
Kir3.4(GIRK4)抗體(50ul) Anti-Kir3.4 (GIRK4)
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