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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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溶酪巨球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-09-28 12:01:08瀏覽次數(shù):317次

聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)
CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP6898 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
溶酪巨球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),,探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加,。

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短,;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈,。
【產(chǎn)品名稱】溶酪巨球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Macrococcus caseolyticus
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6898
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類(lèi)產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
溶酪巨球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
模式菌株分類(lèi)子囊菌類(lèi)酵母菌,。石硯2號(hào)酵母,;模式菌株

模式菌株分類(lèi)擔(dān)子菌類(lèi)onal Antibody英文名稱: Anti-Phospho-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H29NO4性狀:Powder純度:%
Anti-AAMP Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CALB2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H21NO2性狀:Yellow powder純度:98.0%
Anti-AARS Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-AMACR/P504S Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C13H15NO2性狀:Yellow powder純度:98.5%
Anti-AARS2 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-CASP9 Monoclonal Antibody分子式:C13H15NO2性狀:Yellow powder純度:97.5%
Anti-AATF Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-HSP90AA1 alpha Monoclonal Antibody分子式:C18H19NO2性狀:Yellow powder純度:98.5%
Anti-ABAT Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CD80 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C13H17NO3性狀:Powder純度:97.5%
Anti-ABAT Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CD34 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H17NO3性狀:Yellow powder純度:%    Nantenine特異性: 人、大鼠,、兔,、小鼠AP/liver/kidney/bone mRNA原位雜交試劑盒
Hernandezine特異性: 人APC mRNA原位雜交試劑盒
Oxyberberine特異性: 人、大鼠,、小鼠APEX1 mRNA原位雜交試劑盒
Chilenine特異性: 人APLP1 mRNA原位雜交試劑盒
Isomitraphylline特異性: 大鼠,、小鼠APEX1/Ref1 mRNA原位雜交試劑盒
Deltatsine特異性: 人、大鼠,、小鼠APOLYGUS mRNA原位雜交試劑盒
3-Methoxyoxohernandaline特異性: 大鼠Apolipoprotein E mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ABCB11 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-PCNA Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C17H17NO2性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ABCB11 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MBP tag Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C18H21NO3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ABCB6 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-EGFR Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C18H21NO3性狀:Powder純度:95.0%
Anti-ABCB8 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-ACTA2 Monoclonal Antibody分子式:C13H17NO3性狀:Oil純度:%
Anti-ABCB8 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-KRT7 Monoclonal Antibody分子式:C23H29NO5性狀:Powder純度:%
Anti-ABCB9 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-BCL2 Monoclonal Antibody分子式:C23H27NO4性狀:Powder純度:97.0%
Anti-ABCC1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-mCherry tag Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C23H27NO5性狀:Yellow powder純度:%
Anti-ABCC2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-P53 Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C37H42N2O6性狀:Powder純度:%
Anti-ABCC2 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-COX4I1 Monoclonal Antibody分子式:C26H32N2O9性狀:Powder純度:97.0%
Anti-ABCC4?擔(dān)子菌類(lèi)酵母菌,,形成有彈射能力的擲孢子。
溶酪巨球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒LDHA抗體(中間區(qū)域) LDHA Antibody (Center) (LDHA,; L-lactate dehydrogenase A chain,; Cell proliferation-inducing gene 19 protein; LDH muscle subunit,; Renal carcinoma antigen NY-REN-59.)

LDHA抗體(C末端) LDHA Antibody (CT) (LDHA,; L-lactate dehydrogenase A chain; Cell proliferation-inducing gene 19 protein,; LDH muscle subunit,; Renal carcinoma antigen NY-REN-59.)

LDHAL6B抗體(N末端) LDHAL6B Antibody (NT) (LDHAL6B; LDHAL6,; LDHL,; L-lactate dehydrogenase A-like 6B)

Lck抗體 Lck Antibody,LCK,,p56-LCK,,p56lck,YT16,,pp58lck,,LSK

LC3B小鼠單克隆抗體(9H5) LC3B Mouse Monoclonal Antibody(9H5)

LC3B(Cleaved)抗體 LC3B (Cleaved) Antibody

LC3A小鼠單克隆抗體(5G10) LC3A Mouse Monoclonal Antibody(5G10)

LC3A(Cleaved)抗體 LC3A (Cleaved) Antibody

LC3(APG8C)抗體 LC3 (APG8C) Antibody

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