實(shí)驗(yàn)過程：
一,、綿羊皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min,。
3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：綿羊皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ovine Herpesvirus(OHV)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板,、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）,。
本產(chǎn)品只適用于科研,，不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè)，避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Geniposide異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D檢測(cè)試劑盒20mg

普拉克索堿 質(zhì)量規(guī)格：>98.5% Pramipexole Base

Phytic acid1,6-脫水吡喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人氨肽酶O(AP-O)ELISA試劑盒 0.2ml

人白介素12（IL12）(P70) RED/CSA2  軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格:96T/48TApraclonidine Hydrochloride規(guī)格:10mgMxA蛋白檢測(cè)試盒20mg人淋瘤細(xì)胞，Raji細(xì)胞1x10^6cells

Paclitaxel異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E檢測(cè)試劑盒20mg

 糖肉湯培養(yǎng)基/Lactose Broth Medium用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)前增菌,；大腸菌群的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

gentiopicrin阿尼利定標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人AP-1復(fù)合體亞基mu-1(AP-1 complex subunit mu-1)ELISA試劑盒 0.2ml

人白介素12（IL12）(P40)ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4  血管生成素3/血管生成素4抗體規(guī)格:96T/48TAprepitant規(guī)格:125mgNADH細(xì)胞色素b5還原酶檢測(cè)試盒20mg人淋母細(xì)胞,，T2 (174xcem.T2 )細(xì)胞1x10^6cells

98%5g5g果膠酶Y23mumps virus antibody

 Toll樣受體9(TLR9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Toll Like Receptor 9 (TLR9)

ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(723)  促上腺皮質(zhì)激素（723）(抗原）進(jìn)口、分裝α2干擾素檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒494199

97%50mg5ml果膠酶Y23Mhyopneumoniae

標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% Tsumacide solution

Actin Alpha /AlphaSMA (Actin alpha , smooth muscle aorta)  肌動(dòng)蛋白(抗原）進(jìn)口,、原裝5羥色胺3檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒494227337

98%10mg5g果膠酶Poliovirus IgA antiobody

 亞鹽-多粘菌素-磺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS) 規(guī)格： 250g 用途： 用于食品和礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(GB/T 8538-2008,，GB/T4789.28-2003中4.69,，GB/...

AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1)  脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1現(xiàn)貨供應(yīng)5羥色胺4檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4942476
綿羊皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒芥子堿鹽 CAS號(hào)： 7431778 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

α三聯(lián)吩 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

香荊芥 CAS號(hào)： 499752 規(guī)格： HPLC≥98%;50mg 訂購(gòu)|咨詢

正壬 CAS號(hào)： 112129 規(guī)格： HPLC≥95%;0.1ml 訂購(gòu)|咨詢

對(duì)氧肉桂 CAS號(hào)： 1929302 規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

大蒜素 CAS號(hào)： 539866 規(guī)格： UV≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫萁 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

漿苦味素L CAS號(hào)： 113146740 規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

相思子堿 CAS號(hào)： 21339559 規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

王不留行黃苷 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

阿多尼弗林堿 CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

旱蓮苷A CAS號(hào)：  規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫蘇 CAS號(hào)： 539526 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

苦素 CAS號(hào)： 125675094 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

西瑞香素 CAS號(hào)： 2034697 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7,，6，5,，4,，3，2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
5. 換槍頭,，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取,，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,，一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照,。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好,。