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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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牡蠣皰疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-09-30 09:33:52瀏覽次數(shù):299次

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CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP7039 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
牡蠣皰疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

【產(chǎn)品名稱】牡蠣皰疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Ostreid herpesvirus(OsHV)
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7039
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
牡蠣皰疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
99%5g25g1羥基2基蒽醌7365459alkaline phosphatase

利莫那班羧 質(zhì)量規(guī)格:>98% Rimonabant carboxylic acid

氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 BPIFB1 / LPLUNC1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit  人髓樣分化子初次應(yīng)答基88CAS號(hào):104517966 鯊烯合酶檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒3095952

98%250mg100g1羥基2基蒽醌1132612basic fibroblast growth factor 9

 人黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:MV3

氨基端前鈉素(NT-ProBNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*250(g)

Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit  人干擾素活化基205CAS號(hào):104376796抗性淀粉檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒30964002

長(zhǎng)梗冬青苷; 具棲冬青甙; 長(zhǎng)梗冬青甙鈣熒光探針Fluo3, AM  5mg

尼可占替諾(煙占替諾)  英文名稱:Xantinol nicotinate (xanthinol nicotinate)   保存:-20℃   規(guī)格:100mg 環(huán)指蛋白180抗體

AAT(Alpha1Antitiypsin)  α1抗胰蛋白酶(抗原)*谷氨合成酶檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒4940118

棘苷鈣熒光探針Fluo3, AM  5mg

金石蠶苷  英文名稱:Jinshi silkworm glycoside   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 小細(xì)胞跨膜糖化蛋白抗體

FPP(Fertilization Promoting Peptide)  受精促進(jìn)肽進(jìn)口,、分裝趨化子CC基元配體15檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4940118

5,6,7,3',4'五基黃BAPTA四鈉鹽5mg

植鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Phytic acid dodecasodium salt hydrate 3% NaC1鳥(niǎo)氨脫羧酶發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

多肽產(chǎn)品  多肽產(chǎn)品進(jìn)口,、原裝L乳脫氫酶A鏈檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒4940390
牡蠣皰疹病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒大豆皂苷Ab CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

25氧澤瀉A CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

菜油甾 CAS號(hào): 474624 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

24酰澤瀉F CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥97%;5mg 訂購(gòu)|咨詢

澤瀉B CAS號(hào): 18649939 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

25脫水澤瀉A;澤瀉G CAS號(hào): 155521463 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

澤瀉F CAS號(hào): 155521452 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

青 CAS號(hào): 80286584 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

黃芪中分離物 CAS號(hào): 215776786 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg 訂購(gòu)|咨詢

(3β,6α,16β,20R,24S) CAS號(hào): 1324005517 規(guī)格: HPLC≥97%;5mg 訂購(gòu)|咨詢

異黃芪皂苷II CAS號(hào): 86764116 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

異黃芪皂苷I CAS號(hào): 84676880 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

8姜 CAS號(hào): 36700455 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

23酰澤瀉C CAS號(hào): 26575939 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

麥冬高黃A CAS號(hào): 74805906 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

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