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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 10:40:55瀏覽次數(shù):332次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6944 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】亞洲分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Mycobacterium asiaticum
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6944
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
亞洲分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
AstragalosideⅢ中性粒細(xì)胞防御素13檢測(cè)試劑盒20mg
餓螞蝗 英文名稱:Manyflower tickclove herb 保存:-20℃ 規(guī)格:1g 色素上皮源性因子抗體
抗核糖體抗體(Anti-rRNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1000(g)
Flt3L(Human FMSlike tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣酪氨激酶3配體CAS號(hào):112809515 花青素還原酶檢測(cè)試盒50THuman/人Elisa試盒3034535
AstragalosideⅡ中性粒細(xì)胞防御素3檢測(cè)試劑盒20mg
五味子醇乙;schisandrol B 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢 MEM培養(yǎng)基/伊格爾培養(yǎng)基/伊格爾極限必需培養(yǎng)基/MEM/SMEM細(xì)胞培養(yǎng)用10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*250(g)
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶CAS號(hào):112801 核糖核檢測(cè)試盒100THuman/人Elisa試盒3034535
畢靈,;荷包牡丹;烏龜Lip2000轉(zhuǎn)染試劑5mg
甲基反亞油甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Methyl linolelaidate
pig IgG (親和純化) 豬IgG進(jìn)口,、原裝硫酰肝素檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒478980039
3,5,7三羥基黃CCK試劑盒5mg
3,29-二甲?;闃侨嗜? 英文名稱:3,29- two benzoyl Trichosanthes Jen three alcohol 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支 短鏈L-3羥基輔酶A脫氫酶抗體
pig IgM (親和純化) 豬IgM現(xiàn)貨供應(yīng)溶血素O檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒478980040
奇壬醇CCK試劑盒5mg
L-亮氨 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 粘蛋白13抗體
Mink IgG 貂IgG (親和純化)*可溶性凋亡相關(guān)子檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒478980040
亞洲分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒25氧原人參三;25OCH3 CAS號(hào): 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
3O沒食子;3OMethy CAS號(hào): 3934847 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
57氧異黃;5Meth CAS號(hào): 82517122 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
5糠醛;5Methyl furf CAS號(hào): 620020 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
芥子堿鹽;Sinapine thi CAS號(hào): 7431778 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
4氧楊;2Hydroxy4 CAS號(hào): 673223 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
金松雙黃;Sciadopitysin CAS號(hào): 521346 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
角鯊;Squalene CAS號(hào): 7683649 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
原薯蕷皂苷;Methylprotod CAS號(hào): 54522520 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
6姜;6Shogaol CAS號(hào): 555668 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
10姜;10Gingerol CAS號(hào): 23513157 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
氧醉椒素 ;Yangonin CAS號(hào): 500620 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
異茜草素1 ;Rubiadi CAS號(hào): 7460437 規(guī)格: 10mg 訂購(gòu)|咨詢
姜;Zingerone CAS號(hào): 122485 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
蓮心堿;Neferine CAS號(hào): 2292162 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
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