【產(chǎn)品名稱】副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Mycobacterium paratuberculosis
【產(chǎn)品編號】YSP6959
【包裝規(guī)格】50T
【預期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測,，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術,，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測,。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應體系保證更高的擴增效率,。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因,，與同類產(chǎn)品相比,，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高,。
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PCR實驗方法步驟：
副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中,，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min,，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min,。
3：結束反應,，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油,，需用100μl進行抽提反應混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板,；
（2）引物與模板退火,；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),，通過多次循環(huán)反應，使目的DNA得以迅速擴增,。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈,；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短,；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈,。
97%5g5g苦參醇B108203Xanthine Oxidase

3-氧芐醇(98%) 質量規(guī)格：0.98 3-Phenoxybenzyl alcohol BHK-21(倉鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2

Sophocarpine阿夫唑嗪系統(tǒng)適應性混合物標準品規(guī)格：規(guī)格：人雄激素受體(Androgen receptor) Polyclonal Antibody 0.2ml

AQP4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit  人水通道蛋白4CAS號：1115704 硫鹽檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒304552

97%25g25g苦參醇M352932xanthineoxidoreductase

環(huán)星雜質C 訂購|咨詢 規(guī)格： 50mg 6號染色體開放閱讀框165抗體 ADIG ELISA Kit 脂生蛋白(ADIG)ELISA試劑盒

Taxifolin尿囊素標準品規(guī)格：規(guī)格：人線粒體烏頭水合酶(Aconitase)Polyclonal Antibody 0.2ml

AQP3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit  人水通道蛋白3CAS號：111470996半胱氨蛋白酶檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒304552

99%100ml250mg脫核糖核(DNA)檢測試劑盒(二微板法)IgD5

欖香 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 膽固醇24α7羥化酶抗體 MUC12 ELISA Kit 粘蛋白12(MUC12)ELISA試劑盒

1ml酪氨酶檢測試盒5mg睪檢測試盒Progesterone

99%1g5g5′核苷檢測試劑盒(過化法)Fatty Acid Extenase 5

茵芋堿 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg 淋巴細胞蛋白酶相關蛋白抗體 ENG ELISA Kit Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒

1ml過氧化氫酶檢測試盒5mg孕檢測試盒Estradiol

98.5%5g50mg5′核苷檢測試劑盒(過化法)nicotinamide adenine dinucleotide

隱色結晶紫(標準品) 質量規(guī)格：分析標準品 Leucocrystal Violet

1mlβ氨基己糖苷酶A檢測試盒5mg雌二醇檢測試盒LuteinizingHormone
副結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒番瀉苷A;Sennoside A CAS號： 81276 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

粉防堿;Tetrandrine CAS號： 518343 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二歐山芹醋;ColuMbiane CAS號： 23180656 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二魚藤;dihydrorotenon CAS號： 6659456 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二石蒜堿;Dihydrolycorin CAS號： 6271212 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二黃連堿; CAS號：  規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二草莓;2Methylvaleri CAS號： 97610 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

β,β二酰紫草素;β,βDi CAS號： 24502792 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二石蒜堿;Dihydrolycorin CAS號： 6271212 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二香素;Hydrocoumarin CAS號： 119846 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

５,７二羥色原;5,7dihyd CAS號： 31721945 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

N,N’二蝙蝠葛堿碘物 ;N,N CAS號：  規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

1,7二羥3,4二氧山7 CAS號：  規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

二歐山芹素 ; Columbianet CAS號： 3804704 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

二辣椒素;Dihydrocapsaic CAS號： 19408845 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線,；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,，克隆到同一個質粒載體上,，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線,。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體,，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1,。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性,。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果,。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增,。