實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一,、休斯新孢子蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油,。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：休斯新孢子蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱：Neospora hughsi
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定,，具體見使用方法）,。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷,。

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產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用,，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛勘Ｊ匦蛄性O(shè)計(jì)的專一性引物,，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng),。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè)，避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Synephrine有絲分裂原活化蛋白激酶14檢測(cè)試劑盒20mg

D-果糖;D(-)-Fructose 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 100mg ELISA Kit for Human Serine/arginine-rich splicing factor 1大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)ELISA試劑盒，英文名：UCP2 ELISA Kit

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 COL9A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*100(g)

HSP90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90CAS號(hào)：050540 查爾合成酶檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒3069407

Arbutin誘導(dǎo)型一化氮合成酶檢測(cè)試劑盒20mg

壬(Standard for GC ,>99%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC ,>99%(GC)  Nonoic acid 胰高血糖素(GC)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glucagon (GC)

Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 CHST11 / C4ST-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*100(g)

HSP70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70CAS號(hào)：107959鈣依賴蛋白激酶檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒3069429

98%25g25g膽酶(ChE)檢測(cè)試劑盒(羥三化鐵微板法)epidermalgrowthfactor receptor varianttypeⅢ

硝地平 質(zhì)量規(guī)格：>99%,CP,AR Nifedipine 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞英文名稱：KU812

Dehydrocholic acidBR,，98.5%Bcl2,；腺病E1B相互作用蛋白3檢測(cè)試盒20mgI型膠原檢測(cè)試盒PINT

98%1g1gα淀粉酶(αAMS)檢測(cè)試劑盒(硝基水楊法)Cyclin Dependent Kinase 11

醋地孕（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Chlormadinone Acetate 卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Otubain 1 (OTUB1)

全式鈷氨素檢測(cè)試盒20mgI型前膠原氨基端肽檢測(cè)試盒PICP

98%5g500mg淀粉酶(AMS)檢測(cè)試劑盒(淀粉比色法)Cyclin Dependent Kinase 5

大戟二醇 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 ELISA Kit for Human Hematopoietic prostaglandin D synthase小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)ELISA試劑盒，英文名：TNNT1 ELISA Kit

泛鈷胺素檢測(cè)試盒20mgI型前膠原羧基端肽檢測(cè)試盒Klotho
休斯新孢子蟲探針?lè)晒舛縋CR試劑盒D半乳糖醛 CAS號(hào)： 91510622 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

7木糖紫杉 CAS號(hào)： 90332664 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

7木糖苷10脫酰紫杉 CAS號(hào)： 90332631 規(guī)格： HPLC≥40%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

(+)松蘿 CAS號(hào)： 34769443 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

()薄荷 CAS號(hào)： 10458147 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

左旋箭毒堿 CAS號(hào)： 436055 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

紫堇塊莖堿 CAS號(hào)： 517566 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

紫菫定 CAS號(hào)： 476697 規(guī)格： HPLC≥95%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

正十二巨大戟 CAS號(hào)： 54706706 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

澤蘭黃 CAS號(hào)： 520116 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫羅蘭 CAS號(hào)： 8013909 規(guī)格： HPLC≥98%;0.1ml 訂購(gòu)|咨詢

支脫皂苷元 CAS號(hào)： 511966 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

左旋千金藤啶堿 CAS號(hào)： 16562133 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫蘇 CAS號(hào)： 536594 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

竹紅菌素 CAS號(hào)： 123940545 規(guī)格： HPLC≥97%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
使用方法：
一,、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照,。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取,，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,，一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好,。