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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 11:22:56瀏覽次數(shù):374次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7010 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱】新德里超級(jí)細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7010
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
新德里超級(jí)細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Stevioside原纖維蛋白1檢測(cè)試劑盒100mg
五水合金雀花堿/鷹爪豆堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Sparteini Sulfas
纖維蛋白原(FG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 (His 標(biāo)簽)*200(g)
人基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)phosphoGluR1(Ser836) 化谷氨受體1抗體規(guī)格:96T/48TAmmonium Carbonate (AS)規(guī)格:100mgEVA1;MPZL2檢測(cè)試盒20mg人急性淋細(xì)胞白血病細(xì)胞,,CEM/C1細(xì)胞1x10^6cells
Betaine hydrochloride遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒20mg
小鼠肺細(xì)胞英文名稱:Lewis
補(bǔ)體成分2(C2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 TSPAN1 蛋白 (aa 110-211, His 標(biāo)簽)*250(g)
人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)SCNN1D/δENaC 上皮鈉離子通道蛋白D抗體規(guī)格:96T/48TAmmonium Chloride規(guī)格:100mgE鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白檢測(cè)試盒20mg人狀腺癌乳頭狀細(xì)胞,Bcpap細(xì)胞1x10^6cells
Cy7 亞酰5mg
青陽參苷元 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg 化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 HMGB1 ELISA Kit 高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDS進(jìn)口,、分裝糖盞蛋白檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒490119
Cy5.5 亞酰5mg
甲咪唑 英文名稱:Mebendazole 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg 子宮內(nèi)膜抗體
PACAP(138 Peptide) 腺苷環(huán)化酶激活肽 138(全蛋白)進(jìn)口,、原裝糖萼蛋白檢測(cè)試盒10gHuman/人Elisa試盒4903360
姜酚Cy5 亞酰5mg
丹參素 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 ELISA Kit for Human Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒,英文名:IGFBP2 ELISA Kit
UDCSBR,,98%肝脂肪酶檢測(cè)試盒20mgNFkB誘導(dǎo)的激酶檢測(cè)試盒SubstanceP
新德里超級(jí)細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒酰白藜蘆 CAS號(hào): 42206940 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
茵芋苷 CAS號(hào): 93390 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
亞油 CAS號(hào): 112630 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢
油 CAS號(hào): 112629 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢
硬脂 CAS號(hào): 112618 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg 訂購|咨詢
酰蒲公英萜 CAS號(hào): 2189802 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
異古倫賓 CAS號(hào): 471545 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
吲哚 CAS號(hào): 2380861 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原七葉皂苷元 CAS號(hào): 20853070 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鹽吐根 CAS號(hào): 316427 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氧血根堿 CAS號(hào): 28342316 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
遠(yuǎn)華蟾蜍精 CAS號(hào): 472264 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
氧槐定堿 CAS號(hào): 54809744 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
薏苡素 CAS號(hào): 532912 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
8氧黃連堿 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
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