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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-29 11:12:18瀏覽次數(shù):362次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6993 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱(chēng)】腦粘體蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Myxosoma cerebralis
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6993
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類(lèi)產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
腦粘體蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Oleanolic acid載脂蛋白E檢測(cè)試劑盒50mg
(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ginsenoside Rh2 猴菌 Hericium erinaceusImproved-Lowry蛋白定量試劑盒
Yohimbine Hydrochloride2-氨基-5-苯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人雙調(diào)蛋白(AREG)Polyclonal Antibody 0.2ml
cTnT(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 人心肌特異性肌鈣蛋白TCAS號(hào):581933 有機(jī)檢測(cè)試盒2mgHuman/人Elisa試盒30608629
99%100g5g小構(gòu)樹(shù)醇A554847tissue inhibitors of metalloproteinase 3
10-羥基喜樹(shù)堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,S構(gòu)型,,標(biāo)準(zhǔn)品 (s)-10-hydroxycamptothecin
Nicotine氨魯米特標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血管生長(zhǎng)素(ANG)Polyclonal Antibody 0.2ml
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重鏈CAS號(hào):552150 羽狀斑駁病檢測(cè)試盒5mgHuman/人Elisa試盒3061367
四基羅丹明5(6)異硫(混合物)5mg
正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99.5%(GC) 1-Heptanol
HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白進(jìn)口,、分裝分泌型天冬氨蛋白酶檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4869594
棓兒茶; 沒(méi)食子酰兒茶素6羧基X羅丹明琥珀酰亞(單一化合物)5mg
標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基/SPCA用于細(xì)菌總數(shù)的計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Hu Fibrinogen 人纖維蛋白原進(jìn)口、原裝分泌型天冬氨蛋白酶2檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4870659
芒柄花苷5羧基X羅丹明琥珀酰亞(單一化合物)5mg
三十二(standard for GC,≥98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥98.0%(GC) Dotriacontane
Streptavidin,SA 鏈霉親和素現(xiàn)貨供應(yīng)呼腸孤病III型檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4870659
腦粘體蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒二酰大花旋覆花內(nèi) CAS號(hào): 151513701 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
B木皂苷A CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
毛鉤藤堿 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
齊墩果,,3氧代1228齊 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
當(dāng)藥苷 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
旱蓮苷D CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
常春藤皂苷元28OβD葡萄糖 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
當(dāng)藥黃素 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
(+)Nootkatone CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
氯纈草素 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
6”二沙苑子苷單 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
異莪術(shù) CAS號(hào): 24063716 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
β酰氧異酰阿卡寧 CAS號(hào): 69091174 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
異去蟛蜞菊內(nèi)脂 CAS號(hào): 350681333 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
莪術(shù) CAS號(hào): 19431846 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
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