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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>定量PCR試劑盒>>探針法熒光定量PCR試劑盒>> 50T羊口瘡病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2020-09-29 11:29:40瀏覽次數(shù):344次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP7026 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:羊口瘡病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Orf Virus(ORFV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運輸及保存
低溫運輸,,-20℃保存,,保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,,具體見使用方法),。
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品,。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應,。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR,。
本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷。?
實驗過程:
一,、羊口瘡病毒探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,后在72℃ 保溫7min,。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
2. 標記6個離心管,分別為7,,6,,5,4,,3,,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,,必須設置N+2個提取,,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照),??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍,。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
(+)Catechin Hydrate印度刺猬因子檢測試劑盒20mg
明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠) 規(guī)格: 100g 用途: 供測定細菌液化明膠使用(GB15979-2002和GB/T4789.28-2003 中3.10,,GB/T4789.35-2003)。
Picroside-Ⅰ氨芐青霉素標準品規(guī)格:規(guī)格:人血管緊張素Ⅱ1A型受體(Type-1A angiotensin II receptor)CLIA試劑盒 0.2ml
VS(Human versican/PGM/PG350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖CAS號:372558幾丁質酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒308404
PicrosideⅢ硬骨素檢測試劑盒20mg
化木蘭花堿 質量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品 Magnoflorine chloride
降鈣素(CT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白*250(g)
NFKB p65 (Human NFκΒ p65) KLISA Kit 人細胞核子/k基結合核子CAS號:332木聚糖酶檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒3083101
98%5g1g二醛(MDA)檢測試劑盒(TBA比色法)thioredoxin reductase
NCI-H661(人大細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
鋅原卟啉檢測試盒20mg白細胞介素7檢測試盒Interleukin8
98%250mg5g二醛(MDA)檢測試劑盒(TBA比色法)Glycogen phosphorylase a
位十二內(nèi)酯(分析標準品,≥98.5%(GC)) 質量規(guī)格:分析標準品,≥98.5%(GC) γ-Dodecalactone
Bile salt from poultryBR金屬硫蛋白檢測試盒20mg白細胞介素8檢測試盒Epidermalgrowthfactor
化5mg
5-氟二氫嘧啶-2,4-二 質量規(guī)格:國進口 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 氧發(fā)酵試驗培養(yǎng)基/OF培養(yǎng)基/Hugh-Leifson培養(yǎng)基/HLGB細菌的氧發(fā)酵試驗250克國產(chǎn)/進口
Casein acid hydrolysateBR細胞素相關蛋白AIgG抗體檢測試盒20mg表皮生長子檢測試盒AlanineAminotransferase
羊口瘡病毒探針法熒光定量PCR試劑盒藜蘆 CAS號: 34152 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
龍血素C CAS號: 956103790 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
龍血素A CAS號: 119425897 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
輪環(huán)藤堿 CAS號: 518945 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羅紅 CAS號: 80214831 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購|咨詢
雷公藤吉堿 CAS號: 37239477 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
雷公藤次堿 CAS號: 11088098 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
羅漢松樹脂 CAS號: 580723 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
雷公藤定堿 CAS號: 37239513 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
蘿卜素 CAS號: 4478937 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
羅丹明B CAS號: 81889 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
六羧 CAS號: 535751 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鄰氧肉桂 CAS號: 1533716 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
雷帕 CAS號: 53123889 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
克班寧 CAS號: 25127291 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢馬蘇大麻哈魚病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
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