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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-30 10:23:05瀏覽次數(shù):341次
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分子量 | 詳見說(shuō)明書 | 分子式 | 詳見說(shuō)明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7130 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】兔痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Rabbit Pox Virus(RPV)
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7130
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
兔痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
97%100g5gGama生育三酚136434349Antismooth muscle antibody
桃葉珊瑚苷 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Aucubin
骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 STX8 / Syntaxin 8 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1.05272.0500
SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分CAS號(hào):483400蕓苔素內(nèi)酯檢測(cè)試盒10mgHuman/人Elisa試盒3143020
絡(luò)合指示劑5g25g狼毒色652379antiprothrombins antibodies IgG
親環(huán)素B(CYPB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclophilin B (CYPB)
骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 APLP1 / Amyloid-like protein 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1.05270.0500
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二腺苷CAS號(hào):436349脂肪合成酶檢測(cè)試盒25mgHuman/人Elisa試盒3143020
TQ2亞酰20mg
Amberlite® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂) 質(zhì)量規(guī)格:719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂 Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)
DHL Agar沙門氏菌和志賀氏菌的分離培養(yǎng)半胱氨酰白三烯檢測(cè)試盒20mg瘦素檢測(cè)試盒tetrahydrofolicacid
TQ1亞酰20mg
壬甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Methyl Nonanoate 中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)桿菌屬 Lactobacillus sp.
Gentamycin Agar用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)DDX4檢測(cè)試盒20mg四氫葉檢測(cè)試盒Relaxin
TQ1亞酰20mg
扁塑藤素 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 ELISA Kit for Human Cytochrome P450 2C9小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)ELISA試劑盒,,英文名:Gal-3 ELISA Kit
MHA抗菌素藥物敏感性試驗(yàn)基膜聚糖;內(nèi)腔蛋白檢測(cè)試盒20mg松弛素檢測(cè)試盒myeloperoxidase
兔痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒瑞替加濱Metronidazole,99%10G通用試劑
利巴韋林Norfloxacin,99%5G通用試劑
利巴韋林(標(biāo)準(zhǔn)品)Enrofloxacin,≥98.0%5G通用試劑
核糖Florfenicol,98%5G通用試劑
利福布丁5Fluorocytosine,98%1G通用試劑
利福布?。?biāo)準(zhǔn)品)Rosiglitazone maleate,99%1G通用試劑
利福噴丁Novobiocin Sodium,≥99%250MG通用試劑
利福噴丁(標(biāo)準(zhǔn)品)Cloxacillin sodium salt hydrate100MG通用試劑
利魯唑Dihydrostreptomycin Sulphate,≥98%5G通用試劑
利魯唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Geldanamycin (HPLC,≥98%)25MG通用試劑
地拉羅司,去鐵斯若Potassium oxonate5G通用試劑
地拉羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)Olaquindox,98%5G通用試劑
利培Ceftazidime hydrate,90.0105.0%500MG通用試劑
利培(標(biāo)準(zhǔn)品)Amprolium hydrochloride5G通用試劑
利托那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Indole3butyric acid potassium salt25G通用試劑
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