產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR,。
本產(chǎn)品只適用于科研,，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：熒光假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Pseudomonas fluorescens
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板,、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定,，具體見使用方法）。
使用方法：
一,、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記6個離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）,。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘,，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用,。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,，必須設(shè)置N+2個提取,，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）,?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,，以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,，則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容,。
三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù),，則標(biāo)記N+9個PCR管,，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照,，6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好,。
?
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、熒光假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有,，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min,。
3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測,。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
98%10g5gδ3,2羥基補(bǔ)骨脂酚84676891Phosphatidylglycerol IgG Antibody

 硝鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別綠膿桿菌分解硝鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)

白介素4(IL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白*25000 mL/瓶

Human TacrolimusFK506 ELISA Kit  人他克莫司CAS號：1228222內(nèi)切β1,4葡聚糖酶檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒3141240

98%100g25g1,8十七碳二4,6二炔3,10二醇84680751antiphospholipase A2 antibody

香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Sclareolide

Pseudoginsenoside-RT5巴柳氮鈉標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人胰腺α淀粉酶Polyclonal Antibody 0.2ml

ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit  人上皮特異性抗原CAS號：1205003NADP依賴性甘油醛3脫氫酶檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒3141262

98%25g5g膠原酶HPVIgM

白樺脂醇,；樺  英文名稱：Betulin; betulin   保存：-20℃   規(guī)格：HPLC≥98% 20mg/支 腫瘤壞死因子受體1抗體

RCM梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)鈉葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2檢測試盒20mg妊娠相關(guān)血漿蛋白A檢測試盒orientalisLysozyme

98%100g10g膠原酶cartilage antibody

18-冠-6-(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 18-Crown 6-Ether 嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

Tybobutyricum Broth Base乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)趨化子配體12檢測試盒20mg溶菌酶檢測試盒G1;G2aggrecan;TotalAggrecanforCulture

99%500mg5mg膠原酶C type natriuretic peptide

?；切苋パ跄?質(zhì)量規(guī)格：≥97% Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

SCHAEDLER Agar厭氧菌的分離培養(yǎng)周期素依賴性激酶11檢測試盒20mg軟骨蛋白聚糖G1;G2片段檢測試盒cartilageoligomericmatrixprotein
熒光假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒益康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）DLysine monohydrochloride,≥98%1G通用試劑

恩替卡韋DLPhenylalanine, 99%25G通用試劑

恩替卡韋（標(biāo)準(zhǔn)品）αGalactosidase from green coffee beans5UN通用試劑

依帕司他Glucose6phosphate Dehydrogenase from...100UN通用試劑

鹽表阿5′Nucleotidase human500U通用試劑

鹽表阿(標(biāo)準(zhǔn)品)4Nitrophenyl αDgalactopyranoside100MG通用試劑

埃替非巴肽，依非巴特;安普利肽,，依非巴肽2Nitrophenyl βDglucopyranoside100MG通用試劑

鹽埃羅替尼4Nitrophenyl NacetylβDglucosamin...100MG通用試劑

鹽埃羅替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）αGlycerophosphate dehydrogenase200UN通用試劑

爾它培南;厄他培南Myokinase from chicken muscle1KU通用試劑

雌二,β雌二Pyruvate Kinase from rabbit muscle1KU通用試劑

雌二,β雌二（標(biāo)準(zhǔn)品）Glycerokinase from Bacillus stearother...1KU通用試劑

雌三DLactic Dehydrogenase1KU通用試劑

雌三(標(biāo)準(zhǔn)品)Enterokinase from bovine intestine10UN通用試劑

*泊甙(進(jìn)分)Phytase from wheat5G通用試劑