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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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腦膜蠕蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-09-30 09:38:01瀏覽次數(shù):340次

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP7051 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
腦膜蠕蟲探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加,。

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱】腦膜蠕蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Parelaphostrongylus tenius
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7051
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高,。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
腦膜蠕蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
98%25g5g利血平69004155Collagenase II

桑根 C ;Sanggenon C 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢 MA-891(小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 PNLIPRP1 / PLRP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

RCOR3(Human REST corepressor 3) ELISA Kit  人REST協(xié)阻抑子3CAS號(hào):797類黃3',5'羥化酶檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒30992291

Ligustrazine Hydrochloride型肝炎病毒前S2抗原檢測(cè)試劑盒5mg

膠原蛋白(BR) 質(zhì)量規(guī)格:BR,,魚鱗或魚皮提取 Collagen GoldCassette-GST/GST重組標(biāo)簽蛋白快速檢測(cè)試劑盒(裝)CCD-1095Sk(人腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管旁皮膚細(xì)胞)

細(xì)胞間粘附分子3(ICAM3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 SMR3B 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

COLEC11(Human collectin subfamily member 11) ELISA Kit  人集蛋白亞家族成員11CAS號(hào):733499 類黃3'羥化酶檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒30992291

98%25g500g菠蘿蛋白酶Rhinovirus IgM

泊酚 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,熔點(diǎn)18 Propofol 苞肉牛粒/Dried Meat Particle加入苞肉基礎(chǔ)中配成苞肉培養(yǎng)基100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

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木蘭花; 唐松草; 玉蘭; 洋玉蘭JC15mg

雷尼替丁S-氧化物 質(zhì)量規(guī)格:國(guó)進(jìn)口 Ranitidine S-Oxide 小鼠結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:CT-26 WT

5HT(5HydroxyLtryptophan/L5HTP)  5羥色胺現(xiàn)貨供應(yīng)神經(jīng)酪氨激酶受體1檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒49540003

5(6)羧基2',7'二二熒光素琥珀酰亞5mg

十一 質(zhì)量規(guī)格:>98% Zinc undecylenate 桿菌屬 Lactobacillus sp.植物桿菌 Lactobacillus plantarum

PeptoneBR信號(hào)素3G檢測(cè)試盒20mg肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C檢測(cè)試盒PulmonarysurfatcantassociatedproteinD
腦膜蠕蟲探針法熒光定量PCR試劑盒伊立替康 CAS號(hào): 97682445 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

羥酪 CAS號(hào): 10597601 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

七葉皂苷D CAS號(hào): 219944464 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

七葉皂苷C CAS號(hào): 219944395 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

七葉皂苷B CAS號(hào): 26339902 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

七葉皂苷A CAS號(hào): 123748685 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

德爾塔林 CAS號(hào): 1803152 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

硬飛燕草堿 CAS號(hào): 509182 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

去芹糖桔梗皂苷D CAS號(hào): 78763583 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

去酰車葉草苷 CAS號(hào): 14259553 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

蝙蝠葛蘇林堿 CAS號(hào): 70553763 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

杯莧甾 CAS號(hào): 17086769 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

玉米黃素,;玉米黃質(zhì) CAS號(hào): 144683 規(guī)格: HPLC≥60%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

柯里拉京 CAS號(hào): 23094691 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

千金藤素 CAS號(hào): 481492 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

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