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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-09-30 10:15:55瀏覽次數(shù):445次

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CAS 詳見說(shuō)明書 純度 詳見說(shuō)明書
分子量 詳見說(shuō)明書 分子式 詳見說(shuō)明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號(hào) YSP7111 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短,;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈,。
【產(chǎn)品名稱】普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Proteus vulgaris
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7111
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
指示劑級(jí)25g5g楮樹黃醇B23513157tartrateresistant acid phosphatase

異甜菊醇 ;isosteviol 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*1000 mL/瓶

人8羥基脫氧鳥苷(8OHdG)phosphoCPLA2(Ser505)  化胞漿型脂酶A2抗體規(guī)格:96T/48TBehenoyl Polyoxylglycerides規(guī)格:10mgα1微球蛋白檢測(cè)試盒20mg人食管癌細(xì)胞,,TE1細(xì)胞1x10^6cells

指示劑級(jí)10g25g桑呋A126192antifilaggrin antibody

亞鈉  英文名稱:Sodium selenite   保存:-20℃   規(guī)格:50mg 化復(fù)制因子A蛋白2抗體

抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*5000 mL/瓶

VGCC(Human voltagegated calcium channel) ELISA Kit  人鈣離子通道抗體CAS號(hào):1545801黃醇合成酶檢測(cè)試盒100KUHuman/人Elisa試盒313724

Super Fluor 647(效果同Alexa Fluor 647)20mg

龍膽花  英文名稱:Gentian flowers   保存:-20℃   規(guī)格:0.5g 高度相似的細(xì)胞周期蛋白激酶NEK6抗體  

FGF1 (aFGF )(ECGFbeta)(HBGF1)  肝素結(jié)合生長(zhǎng)子( 性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)子)(多肽片斷抗原)進(jìn)口,、分裝酰基化饑餓素檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4998769

Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)20mg

豆蔻木脂素 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 敏感離子通道1抗體 hnRNP L ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒

ECG2 (sophagus cancerrelated gene2)  食道癌相關(guān)基(抗原)進(jìn)口,、原裝饑餓素檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒4998769

Super Fluor 488(效果同Alexa Fluor 488) 20mg

狼毒乙素  英文名稱:Fischeriana B   保存:-20℃   規(guī)格:20mg/支 絲氨/蘇氨蛋白激酶PCTK2抗體

BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)脂肪檢測(cè)試盒20mg凝血酶原片段F1+2檢測(cè)試盒coagulationfactorⅡ
普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒阿卡波糖4Acetoxy3methoxycinnamic acid (HPLC...1G通用試劑

阿卡波糖(標(biāo)準(zhǔn)品)4Fluorophenyl acetate,≥97.0%5G通用試劑

阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷Tetraethylene Glycol Diptosylate,97%10G通用試劑

阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Bromotris(dimethylamino)phosphonium He...1G通用試劑

腺苷,;腺嘌呤核苷CDP,98%1G通用試劑

腺嘌呤核苷(腺苷)(標(biāo)準(zhǔn)品)1,5Pentanediol,≥97.0%100ML通用試劑

鹽阿地芬寧1Isobutoxycarbonyl2isobutoxy1,2di...5G通用試劑

鹽阿地芬寧(標(biāo)準(zhǔn)品)Nano fumed silica,100140目500G通用試劑

醋阿拉瑞林/氨瑞林 (S)()3Aminotetrahydrofuran2One H...250MG通用試劑

阿侖Equol,98%250MG通用試劑

阿侖2Methoxy4vinylphenol,≥98%5G通用試劑

別嘌Metyrapone,96%1G通用試劑

別嘌(標(biāo)準(zhǔn)品)D(+)chiroInositol,≥97%20MG通用試劑

基雌;雌Sodium glycocholate hydrate,98%250MG通用試劑

基雌(標(biāo)準(zhǔn)品)Sodium glycochenodeoxycholate,≥97%250MG通用試劑

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