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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-30 10:15:55瀏覽次數(shù):445次
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分子量 | 詳見說(shuō)明書 | 分子式 | 詳見說(shuō)明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7111 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火,;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短,;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈,。
【產(chǎn)品名稱】普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Proteus vulgaris
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7111
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為TA cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
指示劑級(jí)25g5g楮樹黃醇B23513157tartrateresistant acid phosphatase
異甜菊醇 ;isosteviol 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*1000 mL/瓶
人8羥基脫氧鳥苷(8OHdG)phosphoCPLA2(Ser505) 化胞漿型脂酶A2抗體規(guī)格:96T/48TBehenoyl Polyoxylglycerides規(guī)格:10mgα1微球蛋白檢測(cè)試盒20mg人食管癌細(xì)胞,,TE1細(xì)胞1x10^6cells
指示劑級(jí)10g25g桑呋A126192antifilaggrin antibody
亞鈉 英文名稱:Sodium selenite 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg 化復(fù)制因子A蛋白2抗體
抵抗素(RETN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*5000 mL/瓶
VGCC(Human voltagegated calcium channel) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體CAS號(hào):1545801黃醇合成酶檢測(cè)試盒100KUHuman/人Elisa試盒313724
Super Fluor 647(效果同Alexa Fluor 647)20mg
龍膽花 英文名稱:Gentian flowers 保存:-20℃ 規(guī)格:0.5g 高度相似的細(xì)胞周期蛋白激酶NEK6抗體
FGF1 (aFGF )(ECGFbeta)(HBGF1) 肝素結(jié)合生長(zhǎng)子( 性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)子)(多肽片斷抗原)進(jìn)口,、分裝酰基化饑餓素檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4998769
Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)20mg
豆蔻木脂素 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 敏感離子通道1抗體 hnRNP L ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒
ECG2 (sophagus cancerrelated gene2) 食道癌相關(guān)基(抗原)進(jìn)口,、原裝饑餓素檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒4998769
Super Fluor 488(效果同Alexa Fluor 488) 20mg
狼毒乙素 英文名稱:Fischeriana B 保存:-20℃ 規(guī)格:20mg/支 絲氨/蘇氨蛋白激酶PCTK2抗體
BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)脂肪檢測(cè)試盒20mg凝血酶原片段F1+2檢測(cè)試盒coagulationfactorⅡ
普通變形桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒阿卡波糖4Acetoxy3methoxycinnamic acid (HPLC...1G通用試劑
阿卡波糖(標(biāo)準(zhǔn)品)4Fluorophenyl acetate,≥97.0%5G通用試劑
阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷Tetraethylene Glycol Diptosylate,97%10G通用試劑
阿昔洛韋,無(wú)環(huán)鳥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Bromotris(dimethylamino)phosphonium He...1G通用試劑
腺苷,;腺嘌呤核苷CDP,98%1G通用試劑
腺嘌呤核苷(腺苷)(標(biāo)準(zhǔn)品)1,5Pentanediol,≥97.0%100ML通用試劑
鹽阿地芬寧1Isobutoxycarbonyl2isobutoxy1,2di...5G通用試劑
鹽阿地芬寧(標(biāo)準(zhǔn)品)Nano fumed silica,100140目500G通用試劑
醋阿拉瑞林/氨瑞林 (S)()3Aminotetrahydrofuran2One H...250MG通用試劑
阿侖Equol,98%250MG通用試劑
阿侖2Methoxy4vinylphenol,≥98%5G通用試劑
別嘌Metyrapone,96%1G通用試劑
別嘌(標(biāo)準(zhǔn)品)D(+)chiroInositol,≥97%20MG通用試劑
基雌;雌Sodium glycocholate hydrate,98%250MG通用試劑
基雌(標(biāo)準(zhǔn)品)Sodium glycochenodeoxycholate,≥97%250MG通用試劑
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