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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>定量PCR試劑盒>>探針法熒光定量PCR試劑盒>> 50T耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2020-09-30 10:01:59瀏覽次數(shù):649次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號 | YSP7088 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實驗過程:
一,、耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物,??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Pneumocystis jirovecii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品,。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,,保存期限一年,。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,,具體見使用方法),。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。?
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,,與相關病毒無交叉反應,。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,,避免后續(xù)污染,。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Mogroside Ⅴ胰島細胞抗體檢測試劑盒20mg
大鼠淋巴管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白*250(g)
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人胺碘CAS號:10035048草檢測試盒100mgHuman/人Elisa試盒31277982
Tetrodotoxin胰島細胞抗原2抗體/蛋白酪氨酶抗體檢測試劑盒20mg
新橙皮苷二氫查爾(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品 Neosperidin dihydrochalcone
載脂蛋白A2(APOA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 Neuropilin 2 / NRP2 蛋白 (Fc 標簽)*250(g)
SA(Human Sialic acid) ELISA Kit 人唾液CAS號:10027653NADPH氧化酶檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒31277982
四基羅丹明5(6)馬來酰亞(混合物)5mg
脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)
Immunoglobuin binding protein1(CD79A)IGBP1 免疫球蛋白結合蛋白1現(xiàn)貨供應15羥化二十碳四烯檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒49800239
四基羅丹明5酰5mg
三殺蟲酯標準溶液(100μg/ml,u=2%) 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% Plifenat solution
CD133 Antigen 造血干細胞抗原(多肽抗原)*鑰孔蟲戚血藍蛋白IgG抗體檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒49805303
6TAMRA 尸5mg
枸櫞米芬 英文名稱:Clomiphene citrate 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體
cerbB2蛋白 cerbB2蛋白(抗原)進口,、分裝布魯氏菌抗體檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒49805303
耶氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒膽紅素 CAS號: 635654 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
根皮素 CAS號: 60822 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蟾毒靈 CAS號: 465214 不是68403268 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白術內(nèi)III CAS號: 73030714 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白術內(nèi)Ⅱ CAS號: 73069144 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白術內(nèi)Ⅰ CAS號: 73069133 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蘆薈苷 CAS號: 1415732 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
苦玄參苷IB CAS號: 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
苦玄參苷IA CAS號: 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
漆黃素 CAS號: 528483 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
烏藥內(nèi) CAS號: 13476250 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
辛夷脂素 CAS號: 31008192 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原蘇木素B CAS號: 102036293 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
龍血素B CAS號: 119425900 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蔓荊子黃素 CAS號: 479914 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。
5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
二,、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),,一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC,。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL,。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三,、設置qPCR反應(20 μL體系,,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復,,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復,。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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