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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-30 10:02:12瀏覽次數(shù):334次
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7086 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】類(lèi)志賀鄰單胞菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱(chēng)】Plesiomonas shigelloides
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7086
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線(xiàn)判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,,擴(kuò)增β-actin基因,,與同類(lèi)產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高,。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
類(lèi)志賀鄰單胞菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min,。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體,。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
98%,含銅屑穩(wěn)定劑100g1g印度榅桲素25168267Macrophage Scavenger Receptor 1
1% NaC1蔗糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
D-(−)-Quinic acid阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人α-基?;o酶a消旋酶(AMACR)ELISA試劑盒 0.2ml
人CCL21PPY/Pancreatic hormone 胰腺激素抗體規(guī)格:96T/48TAvobenzone規(guī)格:1gs腺苷同型半胱氨檢測(cè)試盒20mg人乳腺癌細(xì)胞,BT549細(xì)胞1x10^6cells
98%5g5g前胡香豆素 A145701231MacrophageDerived Chemokine
新橙皮苷二氫查爾 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,BR Neosperidin dihydrochalcone
catalpol阿托伐他汀相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒 0.2ml
人CCL24GABR B3/GABA A Receptor beta 3 G氨基丁受體3抗體規(guī)格:96T/48TAurothioglucose規(guī)格:200mgTammHorsfall蛋白檢測(cè)試盒20mg人乳腺癌細(xì)胞,,BT474細(xì)胞1x10^6cells
99%25g25ml脂肪酶(假絲酵母)tissue kallikrein
四鈉煌綠增菌液 規(guī)格: 2X5支 用途: 含液2ml/支和煌綠1ml/支,,2支添加于100mL(023030)中配成TTB
CD31 (PECAM1) 血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1(抗原)進(jìn)口、分裝胰蛋白酶檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒49761822
99%100ml100ml脂肪酶(豬胰)glutamyl transpeptidase
伏殺硫(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Phosalone
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原進(jìn)口,、原裝15S羥化二十碳四烯檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒49800239
99%5g5g脂肪酶(豬胰)Cytochrome P450 3A5
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基) 規(guī)格: 250g 用途: 用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定,、保存菌種及純培養(yǎng),也可用于消毒效果測(cè)定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,,GB/T47...
Tween80 Medium(Bacteria)油的無(wú)菌試驗(yàn)熱休克蛋白a檢測(cè)試盒20mg降鈣素原檢測(cè)試盒CollagenaseI
類(lèi)志賀鄰單胞菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒β倒捻子素 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
α倒捻子素 CAS號(hào): CAS:6147111 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
亞麻木素 CAS號(hào): 148244820 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
L4羥異亮氨 CAS號(hào): 6001788 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
草烏素 CAS號(hào): 107668791 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
圣草 CAS號(hào): 552589 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
圣草次苷 CAS號(hào): 13463280 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
圣草素70葡萄糖甙 CAS號(hào): 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
補(bǔ)骨脂 CAS號(hào): 10309372 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
青陽(yáng)參苷元B CAS號(hào): 106758547 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
青陽(yáng)參苷元A CAS號(hào): 106644331 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
告達(dá)亭苷元 CAS號(hào): 38395027 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
川陳皮素 CAS號(hào): 478013 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
石杉?jí)A CAS號(hào): 102518796 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
豆腐果苷 CAS號(hào): 80154343 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
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