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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-09-30 10:19:13瀏覽次數(shù):357次
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP7116 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱】雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
【英文名稱】Providencia rettgeri
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7116
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),,所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分,。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),,針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè),。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率,。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),,擴(kuò)增效率更高。?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴(kuò)增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板,;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),,通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈,;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Protopanaxatriol胰蛋白酶檢測(cè)試劑盒20mg
SKIRROW氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/空腸彎菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Skirrow Medium Base用于空腸彎菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Ginsenoside Rd巴芬標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人重組醛糖還原酶(AKR1B1)Polyclonal Antibody 0.2ml
ADMA(Human asymmetrical dimethylarginine) ELISA Kit 人不對(duì)稱二基精氨CAS號(hào):1450959NADP蘋(píng)果脫氫酶檢測(cè)試盒1KUHuman/人Elisa試盒3140736
Protopanaxdiol胰蛋白酶原Ⅱ檢測(cè)試劑盒20mg
利那洛肽 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Linaclotide
Ginsenoside- Rf巴芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人脂聯(lián)素受體蛋白1 Polyclonal Antibody 0.2ml
ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺CAS號(hào):1450959甘油醛脫氫酶檢測(cè)試盒200UHuman/人Elisa試盒3140930
98%250mg500g膠原酶inhibitory subunit of nuclear factorkappa B
HL-7702(人肝正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Gastrin 胃泌素(抗原)*Krueppel樣子4檢測(cè)試盒1gHuman/人Elisa試盒500221
≥97%(HPLC)1g100g膠原酶Minichromosome Maintenance Deficient 2
阿克泰(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% Thiamethoxam
AMACR/P504S(alphamethylacylCoA racemase) α基?;o酶A消旋酶抗原進(jìn)口,、分裝精子頂體酶檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒50033
DABCYL 20mg
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維性蛋白(抗原)進(jìn)口、原裝犬狂犬病IgG抗體檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒50033
雷氏普羅威登斯菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒卡那替尼βNaphthoflavone250MG通用試劑
卡培他濱2,5Diaminotoluene sulfate,97%25G通用試劑
卡培他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)1Vinyl2pyrrolidinone,≥99%10G通用試劑
卷曲1Vinyl2pyrrolidinone,≥99%100ML通用試劑
卷曲(標(biāo)準(zhǔn)品)Polylactic acid,Mw ~60,0001G通用試劑
卡立普多4′Hydroxy3′methoxyacetophenone,98%25G通用試劑
卡立普多(標(biāo)準(zhǔn)品)EDTA,3Na,≥98.0%25G通用試劑
卡維地洛Sodium thiomethoxide,95%1G通用試劑
卡維地洛(標(biāo)準(zhǔn)品)3Acetyldeoxynivalenol,98%1MG通用試劑
西地尼布9Aminoacridine hydrochloride monohydr...5G通用試劑
塞來(lái)昔布,,塞內(nèi)昔布,,賽利克西3Pyridylacetic acid hydrochloride,98%1G通用試劑
塞來(lái)昔布,,塞內(nèi)昔布(標(biāo)準(zhǔn)品)Sodium 2oxobutyrate1G通用試劑
鹽金,鹽氯四環(huán)素Sphingomyelin,≥97.0%25MG通用試劑
鹽金(標(biāo)準(zhǔn)品)NAcetyl4piperidone5G通用試劑
西洛他唑2Methylresorcinol,≥98.0%25G通用試劑
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示,。所述的等比例較佳地為1:1,。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性,。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),,計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果,。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增,。
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