產(chǎn)品名稱：羥脯氨酸（HYP）測(cè)試盒品牌

規(guī)格 : 50管/48樣,、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6421

測(cè)定意義

HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,，膠原蛋白大多分布于皮膚,、腱、軟骨和血管等,，因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo),。

測(cè)定原理

樣品經(jīng)酸水解產(chǎn)生游離的HYP，進(jìn)一步被氯胺T氧化,，氧化產(chǎn)物與對(duì)二甲氨基苯甲反應(yīng),，產(chǎn)生紅色化合物，在560nm處有特征吸收峰,。通過(guò)測(cè)定樣品水解液560nm吸光

值,，可計(jì)算HYP含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平,、烘箱,、玻璃管、離心機(jī),、水浴鍋,、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿,、6mol/L鹽酸和蒸餾水,。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來(lái)不必要的損失,，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml,。

2）. 過(guò)濾混濁溶液,。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0,。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）,。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品,。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,，用水溶解提取,。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取,。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定,。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn),。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷,、鈾、鎳,、銅,、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了,。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾,。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低,、操作簡(jiǎn)便,、快速

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時(shí),，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡,。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。

2.        棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng),，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

Anti-PRDX3/FITC 熒光素標(biāo)記過(guò)氧化還原酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

擬南芥IKI3抗體 Anti-IKI3 family protein 0.2ml

Donkey anti-Gpig IgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清 1ml

FAKD3 英文名稱： 下頜發(fā)育綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國(guó)公司分裝

VEGF-A 英文名稱： 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 0.1ml

DNA polymerase delta 英文名稱： DNA聚合酶γ抗體 0.2ml

Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SUZ12 英文名稱： 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml

Estrogen Related Receptor gamma 英文名稱： 雌受體相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml

胸腺素β10抗體 Anti-Tβ10 0.1ml

Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標(biāo)記原肌球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

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