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當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>試劑耗材>> 含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶
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廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-23 13:53:42瀏覽次數(shù):372次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL |
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貨號 | YS-02X10347 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品名稱:含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶
規(guī)格:1mL
貨號:YS-02X10347
細(xì)胞生長實驗 :細(xì)胞生長良好,,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織,。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,,貼壁培養(yǎng),。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;Glutamax(invitrogen 35050061),1%,;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),,1%;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),,細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),,10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管,。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,,吹打不可太用力,,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,,不是加入凍存液再吹打,。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格,,我從10%-90%都用過,,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛,!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,,放在4度冰箱預(yù)冷,。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管,。
(5)關(guān)于“慢凍",,傳統(tǒng)的方法,細(xì)胞凍存管用棉花包好,,4度2h,,-20度2h或更長,-80度過夜,,最后液氮,。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,,內(nèi)裝異丙醇,,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,,很方便,,省了包棉花、4度,、-20度了,。
CA-2 ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
TSHR 促甲狀腺素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體 規(guī)格 0.2ml
FE ELISA Kit 大鼠鐵蛋白 96T
NLRP7 英文名稱: 富含亮酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml
ARF3 英文名稱: ADP核糖基化因子3抗體 0.2ml
TSHR 促甲狀腺素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
OIT3(human oncoprotein induced transcript 3) ELISA Kit 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜促性腺抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MIRK/Dyrk1B 雙特異性酪磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B 規(guī)格 0.2ml
GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因 96T
RNF215 英文名稱: 環(huán)指蛋白215抗體 0.2ml
CHCHD3 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體 0.1ml
Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜促性腺抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Biotin/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 0.5ml
GPR3 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K16) 乙?;M蛋白H4(K16)抗體 規(guī)格 0.1ml
MK1/ MAPKK 1/FITC 熒光素標(biāo)記MK1/ MAPKK 1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Biotin/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格 0.1ml
TLR9/CD289/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶動物源性食品鼠源基因檢測試劑盒20次安氏網(wǎng)尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
動物源性食品貓源基因檢測試劑盒20次牛肺線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
動物源性食品狗源基因檢測試劑盒20次愛德華氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
肉類食物樣品處理試劑盒20次產(chǎn)氣腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品杏仁(almond)基因檢測試劑盒20次闊盤吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品榛果(hazelnut)基因檢測試劑盒20次艾美耳球蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品核桃(walnut)基因檢測試劑盒20次馬皰疹病4型探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品山核桃(pecan)基因檢測試劑盒20次大擬片形吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品腰果(cashew)基因檢測試劑盒20次網(wǎng)尾線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品開心果(Pistachio)基因檢測試劑盒20次胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品花生(peanut)基因檢測試劑盒20次伊蒙微小菌探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品小麥(wheat)基因檢測試劑盒20次耐久腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品大麥(barley)基因檢測試劑盒20次糞腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品芹菜(cellery)基因檢測試劑盒20次槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
植物源性食品芥末(mustard)基因檢測試劑盒20次鮰愛德華氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,,加熱溶解,,補充水分,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定,。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL,;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌,。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高。因此,,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,,殺菌效果好,。
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