產(chǎn)品名稱(chēng)：含10mL酶解緩沖液;胰凝乳蛋白酶

規(guī)格：1mL
貨號(hào)：YS-02X10353

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好,，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃,，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性,。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；Glutamax（invitrogen 35050061）,，1%,；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%,；雙抗,，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài),，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合,，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散,；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低,，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107）,，一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管）,，10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打,，切忌胰酶消化過(guò)度,，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡,。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液,。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很?chē)?yán)格,，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大,，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外,，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,，移入凍存管,。

（5）關(guān)于“慢凍",，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好,，4度2h,，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜,，最后液氮,。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒,，內(nèi)裝異丙醇,，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便,，省了包棉花,、4度、-20度了,。

MMP-15/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 TSH/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse  Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml

GABRQ 英文名稱(chēng)： G基丁酸A型受體θ/GABAA Rθ抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PTRF RNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體 規(guī)格 0.2ml

 TSH/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Dsg-1(Human desmogleins 1) ELISA Kit 人橋粒芯糖蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Hepatitis E Virus ORF3 戊型肝炎病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MHC class I antigen B 15 組織相關(guān)抗原HLA-B15抗體 規(guī)格 0.1ml

TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit 人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶 96T

RNF19B 英文名稱(chēng)： 環(huán)指蛋白19B抗體 0.1ml

CEP63 英文名稱(chēng)： 中心體蛋白63抗體 0.1ml

 Hepatitis E Virus ORF3 戊型肝炎病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rabbit  Bov IgG/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml

GPR40 英文名稱(chēng)： G蛋白偶聯(lián)受體40抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ack1 醋酸激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml

 Mdr-1/FITC 熒光素標(biāo)記多藥耐藥蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Biotin/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格 0.1ml

 TLR1/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
含10mL酶解緩沖液;胰凝乳蛋白酶糞便副傷寒沙氏菌B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次雞貧血病探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

環(huán)境傷寒沙B（Salmonella Paratyphi B）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次綿羊夏伯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

副傷寒沙B（Salmonella Paratyphi B）標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2次巨病探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

動(dòng)物病原基因檢測(cè)試劑專(zhuān)題雞傳染性貧血病探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

名稱(chēng)規(guī)格鸚鵡熱嗜衣原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

通用型禽感（avian influenza,；AI）基因檢測(cè)試劑盒20次弗氏檸檬酸桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

通用型禽鼻氣管炎和腫頭綜合征（TRT）基因檢測(cè)試劑盒20次嗜人錐蠅探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

通用型禽鼻氣管炎（ART）基因檢測(cè)試劑盒20次敗血梭狀芽胞桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

通用型禽H5N1基因檢測(cè)試劑盒20次豬囊尾蚴探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

通用型禽腦脊髓炎（Avian Encephalomyelitis；AE）20次茹拉巴德古柏線蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒肺炎嗜衣原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

通用型禽鼻氣管炎鳥(niǎo)桿菌（Ornithobacterium rhinotracheale,；ORT）20次球孢子菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒犬流感病32型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

通用型禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖?。?/span>Reticuloendotheliosis Virus；REV）20次百日咳波氏桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

基因檢測(cè)試劑盒結(jié)腸彎曲桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,，選擇適宜的培養(yǎng)基,，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),，標(biāo)記劃線,，加熱溶解，補(bǔ)充水分,，測(cè)定酸堿度,，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明,。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml）,，塞好棉塞用牛皮紙包扎好,，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌,，常用高壓蒸汽滅菌法,。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的,。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,，即壓力越大，蒸汽溫度就越高,。因此,，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好,。而且在濕熱情況下,，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性,，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),，殺菌效果好。