【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細(xì)閱讀購買說明,！

產(chǎn)品名稱：異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒規(guī)格

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測試方法:微量法,、紫外分光光度法

貨號：YS-01S6706

測定意義

ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中,，油料作物種子在萌發(fā)過程中，通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物,。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,。

測定原理：

ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD,，NADH在340nm下有特征吸收峰,，監(jiān)測340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、移液器,、1mL石英比色皿,、研缽、冰和蒸餾水

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,，體積可達(dá)2.000ml,。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0,。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）,。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品,。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,，用水溶解提取,。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取,。

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定,。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬,。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷,、鈾、鎳,、銅,、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了,。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾,。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低,、操作簡便,、快速

H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser494) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

改良Western及IP細(xì)胞裂解液 100ml

Phospho-ZAP70 (Tyr493) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

DYX2/KIAA0319 英文名稱： 閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體 0.2ml

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human

FOXJ1/HFH-4 peptide 插頭蛋白J1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

ECL化學(xué)發(fā)光顯色液(A和B各50ml) 套

ZAR1 英文名稱： 受精卵抑制蛋白1抗體 0.2ml

phospho-Dishevelled 2 (Ser143) 英文名稱： 磷酸化蓬亂蛋白2抗體 0.1ml

CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human

Septin 8 英文名稱： 細(xì)胞分化蛋白SEPT8抗體 0.2ml

Phospho-HER2 (Tyr1221) 英文名稱： 磷酸化HER2受體抗體 0.1ml

5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白抗體 Anti-5-HTT/SERT 0.1ml

Anti-VWF/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 鈣激活氯離子通道4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
異檸檬酸裂解酶（ICL)測試盒規(guī)格甲基(分析標(biāo)準(zhǔn)品)獐牙菜苦苷組織IGF-1R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/mL,基體：甲)肉桂酸INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

殘殺威標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)蘆薈苷組織INSULIN R酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%)桉油精I(xiàn)TK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)檀香油組織ITK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)4-甲氧基JAK3酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

氧化標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=6～5%，基體：酮)對二甲氨基苯甲組織JAK3酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)對羥基丁酯LCK酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
操作步驟:

實驗開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘,。為保證實驗結(jié)果有效性,，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,，甩干,，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制）,，酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色,。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液,。