【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細閱讀購買說明,！

產(chǎn)品名稱：吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）測試盒說明書

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測試方法:微量法,、可見分光光度法

貨號：YS-01S6423

測定意義

脯氨酸是植物體內(nèi)適應逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同，分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑,。吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS,， Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase）是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關鍵酶，對植物適應逆境脅迫起關鍵作用,。

測定原理：

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,，通過鉬酸銨比色法測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生無機磷的量可確定P5CS活性。

需自備的儀器和用品：

可見外分光光度計,、臺式離心機,、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液,。

3）. 除去樣品中的CO 2 ,。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,，孵育約15分鐘,。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品,。

8 ）. 壓碎,、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取,。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白,。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定,。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法,。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步,。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的,。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法,。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾,、鎳,、銅、銀,、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了,。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后),。

(6)分析成本低、操作簡便,、快速

Anti-TCF7L2/FITC 熒光素標記轉錄因子7類似物2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

分泌型卷曲相關蛋白1抗體 anti-SFRP1 0.2ml

Phospho-Syk (Tyr525 + Tyr526) 英文名稱： 磷酸化非受體型酪酸蛋白激酶抗體 0.1ml

E2F7 英文名稱： 轉錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌細胞增強因子2抗體 規(guī)格 0.1ml

Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Leptin 瘦素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2抗體(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 規(guī)格 0.1ml

COQ7 Kit Human 人 COQ7 ELISA配對抗體 ELISA

Tsg101 英文名稱： 易感基因101蛋白抗體 0.1ml

C6orf150 英文名稱： 6號染色體開放閱讀框150抗體 0.1ml

Anti-CD2 CD2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

SRRM2 英文名稱： 絲酸/精酸相關核基質(zhì)蛋白2抗體 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1016) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

樣物質(zhì)結合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 Anti-OPCML 1ml

Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標記磷酸化染色體結構維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）測試盒說明書草酸一水(>98%,BC)黃芩素 組蛋白H2A-T120磷酸化檢測試劑盒

過酸(>99%,BR)秦皮素 組蛋白H2A-T129磷酸化檢測試劑盒

氫鈉一水(>98%,BR)秦皮甲素 組蛋白H3-T3磷酸化檢測試劑盒

硫酸鈉十水(>99%,BC)秦皮乙素 組蛋白H3-T11磷酸化檢測試劑盒

司班40綠原酸 組蛋白H3-T45磷酸化檢測試劑盒

鹽酸酪新綠原酸 組蛋白H3-S10磷酸化檢測試劑盒

糠酸(>97%,，BR)隱綠原酸 組蛋白H3-S28磷酸化檢測試劑盒

2-甲基咪唑(>98%,BR)異綠原酸A 組蛋白H3-S31磷酸化檢測試劑盒
操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時,，均需混勻，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量,，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜,，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制）,，酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘,，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl,，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體,，甩干，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘,，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯,，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應,，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,，底物反應時間到后應盡快加入終止液。