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選擇哪種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染方法通常需要綜合多方面的考慮因素,,比如靶向的細(xì)胞類型,,傳遞的分子種類,,以及轉(zhuǎn)染效率哪家強等等諸如此類的問題。我們認(rèn)為,,“zui吸引人的方法就是zui簡單的方法,,即化學(xué)轉(zhuǎn)染方法”。大體...
重組原代細(xì)胞因子要求:1.真實性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析,;必要時應(yīng)用SDS-PAGE,RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實性,。2.純度:應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析...
Tag-lite是SNAP-Tag與HTRF技術(shù)相結(jié)合,用來進(jìn)行活腫瘤細(xì)胞表面受體分析的一種技術(shù),。SNAP和CLIP是小的融合標(biāo)簽蛋白,,可特異地與底物通過芐甲基不可逆共價結(jié)合,其底物分別為芐甲基鳥嘌呤...
研究人員介紹,,人類胚胎細(xì)胞株可分化成人體內(nèi)的各種細(xì)胞及組織,,所以對治療人類重大疾病有巨大潛力。但目前干細(xì)胞療法發(fā)展面臨的一個主要瓶頸就是移植后的免疫排斥,。新研究的成功關(guān)鍵在于開發(fā)出一種“人源化”實驗鼠...
原代細(xì)胞活性是判斷體外培養(yǎng)細(xì)胞在某些條件下是否能正常生長的重要指標(biāo),如藥物處理,、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件變化等,。目前常用的方法有很多,如有臺盼藍(lán)染色法,、克隆(集落)形成法,、H放射性同位素?fù)饺敕ā...
(1)選擇處于對數(shù)生長期的原代細(xì)胞,,在凍存前一天換液,。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化,。適時去掉胰蛋白酶,,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,,使其成為均勻分...
原代細(xì)胞消化時,,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,,不去除是沒有問題的,。如果消化液中含有胰酶和EDTA,去除,。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,,使細(xì)胞分離,。但EDTA不能被血...
腫瘤細(xì)胞和誘導(dǎo)型人多能干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的心肌細(xì)胞相似,具有相同的形態(tài)結(jié)構(gòu),且隨著培養(yǎng)時間的推移,功能性K+、Na+,、Ca2+通道密度逐漸增加,、心肌特異性基因ANF、α-MHC,、MLC-2a的表達(dá)量增加,...
腫瘤細(xì)胞是一群能自我更新并分化為各種成熟血細(xì)胞的多能干細(xì)胞,。基于其重建血液系統(tǒng)的能力,,造血干細(xì)胞移植已成功用于治療白血病等惡性血液疾病,。如何體外誘導(dǎo)和擴(kuò)增足夠數(shù)量且有功能的HSPCs,是臨床上惡性血液...
原代細(xì)胞臨床上燒傷常常并發(fā)感染,、休克,、膿毒血癥、MODS(多器官功能障礙綜合征)等嚴(yán)重并發(fā)癥,,具有很高的病死率,。但是,目前臨床上常用的清創(chuàng)換藥,、抗感染,、補液、生長因子促進(jìn)愈合、自身或者異體移植等治療方...
研究人員利用細(xì)胞株分析技術(shù)發(fā)現(xiàn)Lgr5+小腸干細(xì)胞來源的祖細(xì)胞實際上包含了兩個不同的細(xì)胞群體,,進(jìn)一步揭示了小腸干細(xì)胞分化過程的zui早期步驟,。位于每個小腸腸窩底部的LGR5+小腸干細(xì)胞是維持干細(xì)胞和小...
血清是原代細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,,具有極為重要的功能,。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,,以及主要的低分子營養(yǎng)物,。2.提供...
1.細(xì)胞系將處理好的蓋玻片放在12孔板底部如果細(xì)胞貼壁不牢(如HEK293)或者是半貼壁細(xì)胞(如PC12),可以用細(xì)胞刮子將鼠尾膠原均勻地涂抹在玻片上包被,。也可使用多聚賴氨酸,,但是效果不如鼠尾膠原。事...
腫瘤細(xì)胞之間的信息傳遞可以通過細(xì)胞表面的受體與配體的相互作用,,也可以通過細(xì)胞產(chǎn)生的可溶性分子,。參與白細(xì)胞間相互作用的可溶性分子稱為白細(xì)胞介素(interleukin,IL),,簡稱白介素,,通常將其中單核...
在分離單核腫瘤細(xì)胞時,我們就必須采取措施來降低血小板污染,。在制備單核細(xì)胞懸液時,,Stemcell給出了如下的建議:1.從Ficoll密度梯度離心中取出單核細(xì)胞層時,避免吸到富含血小板的血漿,。2.緩慢離...
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