（1）選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的原代細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,，用0.25% 胰蛋白酶消化,。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液,。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮細(xì)胞則不要消化處理,。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,，10分鐘)。

（2）去上清液,，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基,，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。（凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢,？答案是不一定的,，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇，像有些科研君們就用corning胎牛血清,也有人用sigma的小牛血清）

（3）將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,，每管0.25ml,。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,，同時(shí)作好登記（日期,、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù)）,。

（4）將裝好原代細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,，-80℃冰箱過(guò)夜。,；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,，2h;-80℃,，2h;放入液氮罐。
短亭山麥冬皂苷C    20mg    供鑒別用    111908-201001
魯斯可皂苷            111909-201001
木通苯乙醇苷B    20mg    含量測(cè)定    111910-201001
荷苞花苷    20mg    含量測(cè)定    111910-201001
通關(guān)藤苷H    10mg    供含量    111913-201001
4-羥基苯乙酸    20mg    供含量測(cè)定    111916-201001
女貞苷    10mg    供含量測(cè)定    111918-201001
瓜子金皂苷己    20mg    供含量測(cè)定    111921-201001
原代細(xì)胞