腫瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中如果環(huán)境不適合其生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞的老化現(xiàn)象。這是干細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)難點(diǎn)也是經(jīng)常出現(xiàn)的問(wèn)題,。本文描述干細(xì)胞老化時(shí)出現(xiàn)的跡象,，以及其預(yù)防措施。
干細(xì)胞老化的表現(xiàn)
★ 細(xì)胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒,，表示細(xì)胞開始出現(xiàn)老化,；
★細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡，則表明該細(xì)胞已老化或者已經(jīng)開始分化（在全部細(xì)胞中出現(xiàn)少數(shù)老化細(xì)胞是正常的）,；
★ 細(xì)胞立體感逐漸消失,，細(xì)胞間的間隔不清，部分細(xì)胞扁平狀,，細(xì)胞的形狀趨向多樣,；
★ 貼壁性減退，出現(xiàn)一些漂浮的細(xì)胞,；部分分泌強(qiáng)的細(xì)胞分泌物增多,，細(xì)胞表面會(huì)比較臟；
★ 細(xì)胞增殖速度明顯下降,，分裂相的細(xì)胞明顯減少,。
干細(xì)胞老化的原因和預(yù)防
1) 接種密度的影響：部分干細(xì)胞具有一定的分泌性能，能夠分泌一些對(duì)細(xì)胞有支持能力的因子類物質(zhì),；所以必須維持一定的接種密度,，否則會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖減慢，zui后出現(xiàn)老化,；
2) 消化過(guò)度：消化細(xì)胞時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的表面蛋白有較強(qiáng)的損傷,，所以消化的時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，使用合適濃度和pH 值的消化酶,，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞老化和分化,；
3) 合適的密度的時(shí)候就要傳代：細(xì)胞如果過(guò)密，接觸抑制作用會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的活力減弱并影響增殖導(dǎo)致老化,；
4) 使用合適的血清和培養(yǎng)基：不同的干細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基特別是血清的要求不同,，所以使用不同的培養(yǎng)用的血清進(jìn)行篩選，尋找該干細(xì)胞培養(yǎng)的血清是預(yù)防細(xì)胞老化,，維持腫瘤細(xì)胞正常生長(zhǎng)的重要保證,。