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傳代細(xì)胞生長(zhǎng)周期和傳代比例

時(shí)間:2017-3-3閱讀:577
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細(xì)胞系體外培養(yǎng)技術(shù)中所謂的傳“代”概念并不等于細(xì)胞生物學(xué)中“親代細(xì)胞”與“子代細(xì)胞”中“代”的概念,。傳代培養(yǎng)的實(shí)質(zhì)就是分離后再次培養(yǎng),,進(jìn)行一次分離再培養(yǎng)稱(chēng)之為傳一代,,傳代數(shù)可以衡量培養(yǎng)物的培養(yǎng)年齡。

傳代是細(xì)胞分裂造成的結(jié)果,,細(xì)胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)細(xì)胞周期,,分為間期與分裂期兩個(gè)階段。細(xì)胞周期能準(zhǔn)確表示細(xì)胞增殖速度,。兩次細(xì)胞分裂之間的時(shí)間也可以用細(xì)胞世代時(shí)間來(lái)表示,,所以細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。正常細(xì)胞系培養(yǎng)的世代數(shù)有限,,只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無(wú)限生長(zhǎng)下去,。

傳代代數(shù)與細(xì)胞的世代數(shù)(增殖代數(shù))并不是同一個(gè)概念。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,所說(shuō)的“第6代細(xì)胞”指細(xì)胞已經(jīng)傳代6次,。以貼壁細(xì)胞為例,每傳代一次,,大概要倍增3~6次,,細(xì)胞要經(jīng)歷如下生長(zhǎng)過(guò)程:游離期、貼壁期,、潛伏期,、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和停止期(平臺(tái)期)。當(dāng)細(xì)胞達(dá)到平臺(tái)期時(shí),,就要進(jìn)行傳代培養(yǎng),,否則細(xì)胞會(huì)中毒,發(fā)生形態(tài)改變,。甚至死亡,。

培養(yǎng)細(xì)胞有密度依賴(lài)和接觸抑制的特點(diǎn),,細(xì)胞濃度過(guò)低,不易存活,,表現(xiàn)為細(xì)胞在達(dá)到增長(zhǎng)前有較長(zhǎng)的滯留期,;細(xì)胞濃度過(guò)高,發(fā)生接觸抑制后生長(zhǎng)遲緩甚至死亡,,所以傳代比例通常按1:2~1:4的稀釋度進(jìn)行,。傳代后細(xì)胞系的接種濃度一般為5×10的5次方/mL。

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