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小鼠白介素1βELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟

時(shí)間：2020/5/13閱讀：472
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小鼠白介素1βELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

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