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小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子elisa試劑盒試劑配制:
1,、酶聯(lián)板Assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品Standard：2瓶凍干品,。
3、樣品稀釋液Sample Diluent：1×20ml/瓶,。
4,、生物素標(biāo)記抗體稀釋液Biotin-antibody Diluent：1×10ml/瓶。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent：1×10ml/瓶,。
6、生物素標(biāo)記抗體Biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素HRP-avidin：1×120μl/瓶1：100
8,、底物溶液TMB e：1×10ml/瓶。
9,、濃洗滌液Wash Buffer：1×20ml/瓶,，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10,、終止液Stop Solution：1×10ml/瓶2N H2SO4,。優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏,、特異
2操作——吸附均勻,、吸附性好、空白值低,、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高,、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,，細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子,、炎癥因子,、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測定標(biāo)本中AIF水平,。用純化的抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入AIF抗原,、生物素化的抗小鼠AIF抗體,、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的AIF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度OD值,，計(jì)算樣品濃度,。
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