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微生物還原酶ELISA試劑盒實驗操作步驟

時間:2020/3/11閱讀:297
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微生物HMG-CoA還原酶(HMG-COR)ELISA試劑盒操作步驟:

①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

②.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;

③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL,;空白孔不加。

④.除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

⑤.棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次   (也可用洗板機洗板),。

⑥.每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。

⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的OD值,。

結(jié)果判斷

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),,對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),,繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值,。

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