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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>技術文章>>細胞株污染的清除
培養(yǎng)細胞株一經(jīng)污染,多數(shù)較難處理,。如果污染細胞價值不大,宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室,復蘇或重新購置細胞,,再培養(yǎng),。
若污染細胞價值較大,又難于重新得到,,可采取以下辦法清除,。
一、細菌和真菌的清除
1,、使用抗生素
抗生素對殺滅細菌較有效,。聯(lián)合用藥比單獨用藥效果好。預防用藥比污染后再用藥效果好,。預防用藥一般用雙抗生素,,污染后清除用藥需采用大于常用量5~10倍的沖洗法,于加藥后作用24~48小時,,再換常規(guī)培養(yǎng)液,。此法在污染早期有效。
二,、支原體的清除
1,、用MRA處理
用MRA(Mycoplasma Removal Agent)處理細胞,每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細胞純潔健康,,效果好.
2,、用清洗純化法清除支原體污染的方法
細胞營養(yǎng)馴化→細胞群的篩選→細胞清洗→反復離心洗滌
其原理是利用離心力、細胞,、微生物質量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的,。由于支原體個體小且除發(fā)酵支原體外多為細胞外寄生,所以通過反復洗滌細胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。
如結合敏感抗生素的抑殺作用,,可達到更好的效果,。
3、藥物輔助加溫處理
先用藥物處理后,,再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時,,可殺死支原體,但對細胞有不良影響,。
4,、細胞株使用支原體特異性血清
用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,因特異抗體可抑制支原體生長,,故經(jīng)抗血清處理后11天即轉為陰性,,并且5個月后仍為陰性。但此法比較麻煩,,不如用抗生素方便,、經(jīng)濟,。
5 x 10^5 cells/vial 人毛囊角質細胞 HHFK
5 x 10^5 cells/vial 人淋巴內(nèi)皮細胞 HLEC
5 x 10^5 cells/vial 人淋巴成纖維細胞 HLF
5 x 10^5 cells/vial 人扁桃體上皮細胞 HTEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人口腔角質細胞 HOK
5 x 10^5 cells/vial 人牙齦成纖維細胞 HGF
5 x 10^5 cells/vial 人牙周膜成纖維細胞 HPLF
5 x 10^5 cells/vial 人食道平滑肌細胞 HESMC
5 x 10^5 cells/vial 人食道上皮細胞 HEEpiC
5 x 10^5 cells/vial 人胃平滑肌細胞 HGSMC
細胞株
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