當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>技術文章>>兔食管上皮細胞培養(yǎng)步驟
原代細胞實驗材料:
1. 大兔的正常食管組織
2. 6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸4℃包被過夜
3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素,、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4
4. 手術刀,、解剖剪,、解剖鑷、眼科剪,,眼科鑷
實驗方法:
1. 處死大兔,,取正常食管組織放入含雙抗的PBS(pH=7.2)中反復清洗3次,以洗去組織表面的血絲及粘液,;
2. 小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離,;
3. 分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復沖洗若干次;
4. 將清洗后食管黏膜組織剪成1mm3 左右大小的組織塊,;
5. 再次用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復清洗,,直至清洗液清亮為止;
6. 將黏膜組織塊按1塊/cm2 的密度接種于6孔培養(yǎng)板中,,上皮面朝下,;
7. 將貼滿組織塊的培養(yǎng)板室溫放置5~10分鐘,待組織塊貼壁后,,轉入37℃,、5%CO2 的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
8. 靜置2h左右,,待組織塊基本不會浮起后,,加入0.5-1ml培養(yǎng)液,置于37℃,、5%CO2 的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。3-4天后有上皮原代細胞從組織邊緣爬出,7天左右鋪滿板面,。
人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,,u-T3 ELISA Kit
人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human 8-iso prostaglandin,,8-iso-PG ELISA Kit
人腎素(Renin)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Renin ELISA Kit
人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Epinephrine/Adrenaline,,EPI ELISA Kit
人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit
原代細胞
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