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當前位置：上海研生實業(yè)有限公司>>技術文章>>影響哺乳動物細胞復蘇的因素
影響哺乳動物原代細胞復蘇的因素包括：（a）細胞類型,，（b）生長階段，（c）細胞處于細胞周期的哪個階段,，（d）終懸液中的細胞數(shù)量和濃度,。可通過優(yōu)化以上因素來提高復蘇細胞活力,， 另外,，還需考慮凍存保護劑的特性以及凍存過程的具體操作。
哺乳動物細胞培養(yǎng)對其他細胞和微生物的污染特別敏感,，例如 Hela 細胞,。由于這種特性，初始細胞系可通過同工酶分析,、染色體組型分析,、免疫分析或基因組分析，檢測來源,。凍存前后均應該進行如上檢測,。特別需要注意的是，病毒和支原體污染,。 一套完整健全的哺乳動物細胞系鑒定程序應該包括,，檢查是否存在細菌、真菌,、病毒,、支原體、甚至原生生物原代細胞的污染,。
哺乳動物細胞準備凍存時,，需要將細胞調(diào)整到合適生長狀態(tài)， 確保既能得到足夠的復蘇細胞又無大量非必需生長的細胞,。對大部分哺乳動物細胞來說,，*起始細胞數(shù)為 106-107/ml 左右,。為方便加入等體積的凍存保護劑（2× 凍存保護劑 + 培養(yǎng)基），細胞懸液濃度應以起始濃度的兩倍準備,?；蛘撸部蓪⒊恋砑毎貞以趦龃?保護劑（1× 凍存保護劑 + 培養(yǎng)基）中達到預期細胞數(shù),。細胞操作應該溫和小心,，確保原代細胞在凍存前是健康的。盡量避免劇烈吹打及 高速離心,。適當情況下,，可注入 5% 或 10% CO2 來調(diào)節(jié) pH。
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