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原代細(xì)胞取材的基本要求和注意事項
人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,，是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的*步，若取材不當(dāng),，將會直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng),，現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項敘述如下：
一、取材的基本要求
?。?）取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養(yǎng)成功,，取材時應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細(xì)胞,，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時培養(yǎng),，應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),，于4℃存放。若組織塊較大,，應(yīng)在清除表面血,、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后,，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時間不能超過24h,。對于已切碎的組織或血液,、淋巴組織應(yīng)加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基，按細(xì)胞凍存方式于液氮中冷凍保存,。
?。?）取材應(yīng)嚴(yán)格無菌 所取標(biāo)本材料應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行，為了確保無菌,，對所取材料若疑有污染的可能,，應(yīng)將所取組織在含高濃度抗菌素（400單位/mL）甚至加入適量的兩性霉素B或10%達(dá)克寧液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時以上，再用PBS洗2~3次,，以確保所取材料無菌,。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液（內(nèi)含400單位/mL抗菌素）的小瓶等便于攜帶的物品來取材，所取材料應(yīng)避免接觸有毒有害的化學(xué)物質(zhì),，如碘,、汞等。
?。?）取材和原代細(xì)胞制作時,，要用鋒利的器械，如手術(shù)刀或剃須刀片切碎組織,，盡可能減少對細(xì)胞的機械損傷,。
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