蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過(guò)親和,，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Active Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CLG3; Collagenase 3

型號(hào)：GOY-01D3125

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

風(fēng)濕病學(xué)

物種：Homo sapiens (Human，人)

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.1

應(yīng)用：Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)產(chǎn)品名稱(chēng)：NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白物種：Human,，人MT-ND1; MTND1; NAD1; NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 1; Mitochondrially Encoded NADH Dehydrogenase 1

Eukaryotic Carboxylesterase 2 (CES2)產(chǎn)品名稱(chēng)：羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白物種：Human,，人CE-2; CES2A1; PCE-2; iCE; Intestine,Liver; Methylumbelliferyl-acetate deacetylase 2; Cocaine esterase

Recombinant 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1)產(chǎn)品名稱(chēng)：11-β-羥基類(lèi)固醇脫氫酶1(HSD11b1)重組蛋白物種：Human，人11DH; 11-beta-HSD1; HDL; HSD11; HSD11B; HSD11L; SDR26C1; Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 26C,Member 1

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

松蘿;(+)-Usniacin 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 緩沖MUG/緩沖4-甲基傘形葡糖苷/Buffered MUG Agar濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌數(shù)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肉蓯蓉苷A;Cistanoside A 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 牛膽粉/牛膽汁粉/牛膽抽提液/Bile powder of cowBR,，40%100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

-7-甲;Daphnetin 7 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSA5x1ml國(guó)產(chǎn)

二甲;7,8-dimethoxy 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞英文名稱(chēng)：NR8383

人參皂苷Rk3;Ginsenoside 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基/Total Genes Chromogenic Medium檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時(shí),，細(xì)菌顯紅色250毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人參炔;Falcarinol,，Pana 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 SP2∕0全細(xì)胞裂解液100μg100μg

肉豆寇單甘油酯;Monomyristi 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

 PA-1(人卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

肉豆蔻甘油三酯;Tritetradec 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)活性蛋白人兔子黃體生成素(LH)免疫試劑盒

小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

100µg 鏈激 Streptokinase -20℃保存

1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存

人乳頭狀瘤病毒抗體(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

500mL Tris-HEPES-SDS Running Buffer,10X   Tris-HEPES-SDS Running Buffer,10X   常溫保存

大鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 Martin Agar Medium ,Medium 250g

2 ug pALEX a pALEX a 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人丙轉(zhuǎn)氨/谷丙轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)免疫試劑盒

小鼠血漿激肽釋放(KLKB1)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝