詳細介紹
公司產品僅供科研實驗,、不得用于臨床:
產品名稱 | 組織蛋白酶V(CTSV)活性蛋白人 |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
貨號 | GOY-01D3124 |
英文名稱:Active Cathepsin V (CTSV)
CTS-L2; CTSL2; CATL2; CTSU; CTS-V; Cathepsin L2
型號:GOY-01D3124
酶與激酶
腫瘤免疫
皮膚病學
物種:Homo sapiens (Human,人)
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:8.8
應用:Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
特點:
標記:標記反應簡單,、溫和且很少抑制抗體活性,,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法,。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成,,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見,、敏感性高,。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產品覆蓋350-770nm,。不同的AbFluor基團經恰當的激光可發(fā)光,, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法,。
使用說明:
如發(fā)現RIPA有沉淀,,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。
根據使用量,,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,,使PMSF的最終濃度為1mM?;靹騻溆?(PMSF現用現加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數下,,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 把成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液,。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量),。
用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。
2,、后處理:將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的PAGE,、Western和免疫沉淀等操作,。
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注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結果。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
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