產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Active Glucuronidase Beta (GUSb)

GUS-B; MPS7; Beta-G1

型號：GOY-01D3093

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：-

應(yīng)用：Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告,。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)產(chǎn)品名稱：107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白物種：Human，人INPP4; Inositol polyphosphate 4-phosphatase type I; Type I inositol 3,4-bisphosphate 4-phosphatase

Recombinant Lactate Dehydrogenase C (LDHC)產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶C(LDHC)重組蛋白物種：Human,，人LDH-C; CT32; LDHX; LDH3; Cancer/Testis Antigen 32; LDH testis subunit

Recombinant Calpain 10 (CAPN10)產(chǎn)品名稱：鈣10(CAPN10)重組蛋白物種：Mouse,，小鼠Calcium-activated neutral proteinase 10

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

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