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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>活性蛋白/AP>> 基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2025-04-08 18:43:48瀏覽次數(shù):271次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D3088 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | GOY-01D3088 |
英文名稱:Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)
GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase
型號:GOY-01D3088
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格:10μg,、50μg、200μg,、1mg,、5mg
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Recombinant Cathepsin S (CTSS)產(chǎn)品名稱:組織S(CTSS)重組蛋白物種:Rat,,大鼠CTS-S
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1、在每1mL冷Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,,1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2,、每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3,、取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5min,;
4、取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5,、分裝保存于-70℃,,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1,、貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2、懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,,1000轉(zhuǎn)/分離心10min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5min洗兩次,;
3、在每1mL冷Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,,1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4,、細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5mL~1mL |
5×106個(gè) | 0.2mL~0.5mL |
5、置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15min,;
6、14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7、分裝保存于-70℃,,避免反復(fù)凍融,。
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基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)活性蛋白小鼠M1培養(yǎng)基 M1 Medium 250g
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150次 天凈沙甲基化PCR 2.0試劑盒 Methylation-Specific PCR V2.0 Kit 常溫保存,,蛋白K,、即用型PCR Mix3.0需要-20℃保存,。
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