我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性,、來(lái)源、器官,、類型,、形態(tài),、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書信息,，我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),，讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾！

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)  (STR鑒定正確)

別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

組織來(lái)源    胚胎腎,；以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化

生長(zhǎng)特性    貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)    上皮細(xì)胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,，293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,，293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2),。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主，可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成,。

生物安全等級(jí)    2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基    MEM(PM150467 ATCC改良)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時(shí)間    ~24-30小時(shí)

凍存條件    凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養(yǎng)條件    氣相：空氣，95%,；CO?,，5%溫度：37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達(dá)情況    vitronectin

注意事項(xiàng)    該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔,；換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基,；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正?，F(xiàn)象,，請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。

2.研究條件可以人為控制

pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：

收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；

3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

毒H7亞型(AIV-H7)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

亞型(AIV-H9)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

亞型(AIV-H9)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

禽白血病病毒(ALV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

禽白血病病毒(ALV)核酸檢測(cè)試劑盒    48T

禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測(cè)試劑盒    48T

產(chǎn)品名稱    規(guī)格

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?    48T

口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)    48T

載脂蛋白C3抗體

載脂蛋白E4抗體

自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體

磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

乙酶抗體

磷酸化乙酶抗體

磷酸化Ack1抗體

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。