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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-14 09:53:04瀏覽次數(shù):444次

聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)
CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 25管/24樣
貨號(hào) GOY-01S6333 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅用于科研
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測(cè)試盒公司各類熱銷產(chǎn)品丙型肝炎病毒-NS1
丙型肝炎病毒-NS3
丙型肝炎病毒-NS4a
戊型肝炎病毒
庚型肝炎病毒

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱:線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格25/24
測(cè)試方法紫外分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6333
分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,,廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,,是線粒體內(nèi)膜中最大的蛋白復(fù)合物,。該酶催化一對(duì)電子從NADH傳遞給CoQ,同時(shí)可使O2還原生成O2.-,,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位,。測(cè)定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),,而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài),。

測(cè)定原理

復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小,。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、1mL石英比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存,;
測(cè)定步驟
1
,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2
將試劑一,、二,、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3
,、 加樣表:

圖1.jpg

樣本的前處理
FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),,然后48000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟提取粗酶液。
鋅指蛋白851抗體     形成素2抗體(成蛋白)

嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體     星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100

0酸化c-fos抗體     星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體

0酸化原癌基因c-Jun抗體     星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體

0酸化原癌基因c-kit抗體     星形肌動(dòng)蛋白抗體
大鼠膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNFelisa檢測(cè)試劑盒

大鼠角蛋白1(KRT1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠角蛋白18(KRT18)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa檢測(cè)試劑盒
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH紫外分光光度法測(cè)試盒柱式植物葉綠體 DNAout15   化乙錠溶液 ,10 mg/mL1.5mL

線狀 DNA 清除劑30   化乙錠清除劑100

細(xì)菌 DNAout50   化乙錠干粉 (EB)1g

細(xì)菌 DNAout250   星形細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL

柱式細(xì)菌 DNAout50   星形膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
FBP活性計(jì)算:
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L,;εNADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,,1cm,;V樣:加入樣本體積,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mLT:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g


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