乙醇脫氫酶（ADH）微量法測試盒公司各類熱銷產(chǎn)品FITC標(biāo)記的脂肪細胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體（血管內(nèi)皮細胞生長因子誘導(dǎo)蛋白）
FITC標(biāo)記的血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
FITC標(biāo)記的丁?；鵄合成酶3抗體
FITC標(biāo)記的凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體
FITC標(biāo)記的載脂蛋白樣蛋白6抗體

商品介紹：
ADH是生物體內(nèi)短鏈醇代謝的關(guān)鍵酶,，催化乙醇與乙醛可逆轉(zhuǎn)換，在很多生理過程中起著重要作用,。哺乳動物ADH主要在肝臟生成,，肝臟損傷導(dǎo)致ADH釋放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否異常,。

測定原理：

ADH催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+,，NADH在340nm處有吸收峰，而NAD+沒有,；測定340nm 吸光度下降速率,，來計算ADH活性。

自備儀器和用品：

研缽,、冰,、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板,、可調(diào)式移液器和蒸餾水,。

產(chǎn)品名稱：乙醇脫氫酶（ADH）微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號：GOY-01S6342
分類：輔酶Ⅰ系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存；
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃,，200g離心5min,，棄沉淀，取上清在4℃,，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二,，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L,；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑,，1cm；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL,；V樣總：加入提取液體積，1mL,；T：反應(yīng)時間,，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g,。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明,！
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