商品介紹：
LAP是一類(lèi)能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,，廣泛存在于肝、腎,、胰等組織中,，尤其以肝臟中含量最為豐富。各類(lèi)肝病患者因肝細(xì)胞損傷，血清LAP的活性均有不同程度的升高,，因此，血清LAP活性的檢測(cè)能從不同側(cè)面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展,。

測(cè)定原理：

LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,，后者在405nm有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算LAP活性,。

自備用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。

產(chǎn)品名稱(chēng)：亮氨酸氨基肽酶（LAP）微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào)：GOY-01S6511
分類(lèi)：氨基酸代謝系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存,；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,，蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時(shí)間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時(shí)間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測(cè)定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液,，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L,；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑,，1cm,；V樣：加入樣本體積，0.1 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間,，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測(cè),。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明,！
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BL21(DE3) 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10  百萬(wàn)堿基級(jí)細(xì)菌 (G-)DNAout10 次

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溶液 ,50mg/mL1mL  TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次
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亮氨酸氨基肽酶（LAP）微量法測(cè)試盒角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL  E-64 蛋白酶抑制劑,，20mg/mL10mL

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含 BPE5mL  dUTP 溶液，100mM 0.4mL

角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 不含動(dòng)物成分5mL  dTTP 溶液,，2.5mM2mL

口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL  dTTP 溶液,，100mM0.5mL

卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL  DTT，免稱(chēng)量蛋白級(jí)48 管