詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失,,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:檸檬酸(CA)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6569
分類:三羧酸循環(huán)系列
商品介紹:
CA又稱枸櫞酸,,廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中,,是生物體內(nèi)重要的有機酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中,,是三羧酸循環(huán)第一步反應的產(chǎn)物,,與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關,。
測定原理
酸性條件下,,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰,;通過測定545nm吸光值的增加,,即可計算出樣品中檸檬酸含量。
實驗中所需儀器及設備
可見分光光度計,、低溫離心機,、掌上離心機、可調(diào)式移液槍,、1ml玻璃比色皿,、雙蒸水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存,;
測定步驟
1,、 分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,總時間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,,棄沉淀,,取上清在4℃,8000g離心10min,,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液。
前列腺素E受體3抗體 錨蛋白重復域28抗體
埃茲蛋白抗體 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
轉(zhuǎn)錄因子E2F-4抗體 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體
細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體
內(nèi)皮素-1單克隆抗體 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體
錦葵色素-O-葡萄糖苷含量測試盒
進行凝集(aggregation)采用典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定,。所提供的elisa檢測試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定elisa檢測試劑盒(ELISA),。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,,經(jīng)(biotin)標記,。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌,。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應,;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的待測因
檸檬酸(CA)可見分光光度法測試盒發(fā)酵性酵母 草菇
天藍色鏈霉菌 福氏志賀氏菌
田菁根瘤菌 杜鵑盤多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
木醋桿菌 石刁柏(蘆筍)擬莖點霉 Phomopsis asparagi
肺炎鏈球菌ATCC49619凍干粉 煙草疫霉* Phytophthora nicotianae
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應時間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。