詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:α葡萄糖苷酶(α GC)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6736
分類:糖代謝系列
商品介紹:
α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物,、植物,、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,,催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖,,不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān),,而且與細(xì)胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關(guān),。
測定原理:
α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性,。
自備用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存,;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,,棄沉淀,取上清在4℃,,8000g離心10min,,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應(yīng)時間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。
信號淋巴細(xì)胞活化分子CD150抗體 上皮細(xì)胞有絲分裂蛋白抗體
巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體 上皮細(xì)胞微管相關(guān)蛋白7抗體
果蠅CG6856-PA抗體 上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體
氧化酶COX7A2抗體 上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體
剪切和多聚腺苷酸化特異性因子4抗體 上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)elisa檢測試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
α葡萄糖苷酶(α GC)微量法測試盒鮑氏志賀菌凍干粉 化膿性鏈球菌 質(zhì)控菌株,。
乙酸鈣不動桿菌 產(chǎn)堿假單胞菌
地衣芽孢桿菌 繩狀青霉
擬囊體側(cè)耳、(鮑魚菇) 葡酒色被孢霉
塔賓曲霉 洋蔥曲霉
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