詳細(xì)介紹
商品介紹:
山梨醇廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,,不僅是糖運(yùn)輸形式之一,,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,,在糖代謝,、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測山梨醇含量變化。
測定原理:
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,,在655nm波長有特征吸收峰,。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋,、移液器,、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。
產(chǎn)品名稱:山梨醇可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6727
分類:糖代謝系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存,;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存,;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存,;
測定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎3s,,間歇7s,,總時(shí)間1min),然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,,則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),,6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明,!
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗體 三0酸肌苷焦0酸酶抗體
C-C元件趨化因子26抗體 三0酸肌醇抗體
趨化素抗體 三聚氰胺抗體
補(bǔ)體C2a鏈多肽抗體 三聚氰胺單克隆抗體
著絲粒蛋白C1抗體 三甲基化組蛋白H3抗體
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)elisa檢測試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)elisa檢測試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅰ(TGFβR1)elisa檢測試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)elisa檢測試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(TRPM6)elisa檢測試劑盒
山梨醇可見分光光度法測試盒表面培養(yǎng)基60mm/25cm2 白色鏈霉菌
微黃八疊球菌 壞死梭桿菌壞死亞種
蒼白芽孢桿菌 金黃色葡萄球菌ATCC29213凍干粉
灰樹花 木霉
肺炎鏈球菌 磚紅鏈霉菌